Question

【题目】在冬季部分城市出现雾霾，这与秸秆野外焚烧有-定关系。微生物学家试图通过微生物降解技术使秸秆尽快腐烂，以增加上壤肥力并缓解环境污染。请回答下列有关问题：

（1）微生物学家试图从富含纤维索的土壤中筛选出纤维素分解菌，应使用以纤维素为唯一碳源的培养基进行筛选，再采用___________进行鉴定，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，发酵方法有__________和______两种。

（2）纤维素酶是一种复合酶，其中_________可以将纤维素分解成纤维二糖，继而在_________作用下分解成葡萄糖。

（3）最终在培养基中筛选出了如下表所示的两种纤维素分解菌，其中降解纤维素能力较强的是____________________。

菌种	菌落直径：C（mm）	透明圈直径：H（mm）	H/C
细菌Ⅰ	5．1	11．2	2．2
细菌Ⅱ	8．1	13．0	1．6

（4）若想将纤维素分解菌中的纤维素酶提取出来用于工业生产，需要先将其固定化，一般_______（适宜或不适宜）采用包埋法，原因是______________________________。

Answer 1

【答案】刚果红染色法 固体发酵 液体发酵 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 细菌Ⅰ 不适宜 酶分子很小，容易从包埋材料中漏出

【解析】

1、纤维素的单体是葡萄糖，纤维素酶能够将纤维素范围葡萄糖。纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。纤维素分解菌可以用刚果红染液进行鉴别，能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌。刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

2、微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

3、可以通过稀释涂布平板法或显微镜计数法进行统计计数。

（1）纤维素分解菌可以用刚果红染色法进行鉴别，能够产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，发酵方法有固体发酵和液体发酵两种。

（2）纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，其中C1酶、Cx酶可以将纤维素分解成纤维二糖，继而在葡萄糖苷酶作用下分解成葡萄糖。

（3）分析表格数据可知，细菌Ⅰ的H（透明圈直径）/C（菌落直径）较细菌Ⅱ，故细菌Ⅰ降解纤维素能力较强。

（4）固定化酶不适宜采用包埋法，原因是酶分子很小，容易从包埋材料中漏出。