题目内容
【题目】截止2020年3月，新冠病毒（COVID-19）在全世界范围内迅速传播，中国在抗击疫情的过程中做出了巨大的牺牲和努力，为世界树立了狙击流行病的旗帜和标杆；某科研队伍提出了利用基因工程技术手段研制两种新冠病毒疫苗的思路，主要研制流程如下图，请回答以下问题：
（1）图中①的名称是______________。
（2）进行PCR技术需要的条件有______________。
（3）两种疫苗的研制过程中均涉及了基因工程的相关操作，其核心步骤是______________。进行②过程需要用到的工具酶有______________。
（4）将重组质粒导入受体细胞可采用______________法。
（5）疫苗最重要的目的是对新冠病毒引起的肺炎进行免疫______________（“治疗”或“预防”）；对该疑似患者确诊时，可以对疑似患者进行核酸检测，即采集其咽拭子，与已知病毒进行______________比较。
（6）接种基因工程疫苗比接种灭活获减毒的病毒疫苗更安全，试从疫苗的结构特点解释原因：__________________________________________。
【答案】cDNA 目的基因片段、游离的四种脱氧核苷酸、一对引物、Taq酶 构建表达载体 限制酶、DNA连接酶 显微注射 预防 核酸序列（或RNA．序列或核糖核苷酸序列） 该疫苗不具有遗传物质，不会出现病毒增殖和感染
【解析】
1．基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
2．基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
（1）图中①是新冠病毒RNA逆转录的产物，因此为cDNA。
（2）图中进行PCR技术必备的条件有目的基因片段、游离的四种脱氧核苷酸、一对引物、Taq酶等。
（3）基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤。图中②过程就是基因表达载体构建的过程，该步骤中需要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶，限制酶能识别双链DNA中特定的核苷酸序列，并在该部位把单链中的磷酸二酯键切开，DNA连接酶能够将DNA片段连接起来。
（4）将重组质粒导入受体细胞的方法很多，具体用哪一种要看受体细胞的种类，这里的受体细胞是动物细胞，因此这里用显微注射法将重组质粒导入受体细胞。
（5）疫苗能够激起人体免疫系统产生相应的抗体和记忆细胞，据此可知疫苗的最重要的目的是对新冠病毒引起的肺炎进行免疫预防，对疑似患者确诊时，可以对疑似患者进行核酸检测，即采集其咽拭子，与已知病毒进行核酸序列（或RNA．序列或核糖核苷酸序列）比较，以此来确定病原体的种类。
（6）由图示可知基因工程疫苗是蛋白质疫苗，而灭活获减毒的病毒疫苗依然含有核酸成分，也就是说基因工程疫苗不具有遗传物质，不会出现病毒增殖和感染，因此该疫苗更安全。
