题目内容
【题目】某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。实验基本步骤如下：请回答
（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成_________使培养基的碱性增强。培养基中添加___________作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。
（2）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为__________，理论上，统计的菌落数_____（低、等、高）于接种的实际活菌数目。
【答案】 脲酶（分解尿素的酶） 氨（NH3） 酚红 检测培养基灭菌是否合格 4.7×108 低
【解析】【试题分析】
本题考查微生物的分离、鉴别与培养的相关知识，意在考查学生识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能运用所学知识与原理，对各小题做出合理的和解答的能力。考生可根据题意梳理所学相关知识，对各小题进行分析作答。
（1）分解尿素的微生物含有脲酶（分解尿素的酶），因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成氨（NH3）使培养基的碱性增强；培养基中添加酚红作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。
（2）接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成，用来进行对照，以检测培养基平板灭菌是否合格；根据题意可知，3个平板上生长的平均菌落数C＝(49＋47＋45) ÷3＝47个，涂布平板时所用的稀释液的体积V＝0.1mL，稀释倍数M＝103，所以每毫升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为(C÷V)×M＝(47÷0.1)×103＝4.7×105个，则每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为4.7×105×103＝4.7×108个。当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此，理论上，统计的菌落数往往低于接种的实际活菌数目。
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