题目内容
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
限制酶 | BamH Ⅰ | Hind Ⅲ | EcoR Ⅰ | Sma Ⅰ |
识别序列 及切割位点 | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ | ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ | ↓ GAATTC CTTAAG ↑ | ↓ CCCGGG GGGCCC ↑ |
(1)一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后,分别含有________个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的Sma Ⅰ酶切位点越多,质粒的热稳定性越______。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ切割,原因是________________________________。
(4)与只使用EcoR Ⅰ相比较,使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止______________________________。
(5) 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了__________________________。
(6)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在__________________________________的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
(1)0、2
(2)高
(3)Sma Ⅰ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
(4)质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
(5) 鉴别和筛选含有重组质粒的细胞
(6)蔗糖为唯一含碳营养物质
解析:
略
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