Question

【题目】农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞采用最多的方法。回答下列问题：

（1）与其它细菌相比，农杆菌Ti质粒上的____________可转移至受体细胞，并插入到植物细胞中的___________上。由此推断，用Ti质粒构建目的基因的表达载体时，应将目的基因插入该片段______（填“内”或“外”）部。目的基因在受体细胞中插入该位置使得它的遗传特性能在宿主细胞中________________。

（2）构建的基因表达载体中除含有目的基因外，还必须具有________________________等元件，其中必须位于目的基因上游的元件是____________。

（3）农杆菌转化法更适合于_____________（填“单子叶”或“双子叶”）植物的转化，原因是该类植物体受到损伤时，伤口处会分泌大量的________________________，吸引农杆菌移向这些细胞。

Answer 1

【答案】T—DNA 染色体的DNA 内 稳定维持和表达（或复制和表达） 启动子、终止子以及标记基因 启动子 双子叶 酚类物质

【解析】

基因工程的基本操作程序包括：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。由于受体细胞种类不同，目的基因导入受体细胞的方法不同。

（1）农杆菌的Ti质粒上含有可转移的DNA即T—DNA，将目的基因插入到T—DNA中，通过农杆菌的转化作用，就可能使目的基因进入植物细胞，并插入到植物细胞中的染色体DNA上。目的基因插入植物染色体DNA中后，就可以随着染色体DNA的复制而复制，可以进行自身的转录，也就是说其遗传特性能得以稳定维持和表达。

（2）构建的基因表达载体中，除含有目的基因外，还必须具有启动子、终止子以及标记基因等元件，其中启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录成mRNA，最终获得所需要的蛋白质。

（3）农杆菌转化法更适用于双子叶植物，因为双子叶植物在植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类物质，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中Ti质粒上的T—DNA就可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上。