题目内容
【题目】人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有________________。
(2)将经融合处理后的细胞转到HAT接着基上培养的目的是 ,该细胞 (填“能”、“不能”)产生专一性抗体,所产生的抗体 (填“一定”、“不一定”)能抗HPV。
(3)对于抗体检测呈______性的杂交瘤细胞克隆应进行克隆化培养,克隆化培养的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/mL,每孔加入细胞稀释液______mL(填“0.1”、“1”或“10”),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。
(4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路____________________。
【答案】(1)动物细胞培养、动物细胞融合
(2)筛选出杂交瘤细胞 能 不一定
(3)阳 0.1
(4)通过基因工程向效应B细胞中导入prG或利用核移植技术将效应B细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中(答对其一即可)
【解析】(1)骨髓瘤细胞和某些淋巴细胞在融合前需借助动物细胞培养技术进行培养,融合时采用的技术手段是动物细胞融合技术。
(2)将骨髓瘤细胞和某些淋巴细胞混合并进行融合、转移到HAT培养基上培养的目的是筛选出杂交瘤细胞,该细胞能产生专一性抗体。因所有的杂交瘤细胞在HAT接着基上都能生长增殖,因此筛选出的杂交瘤细胞所产生的抗体不一定能抗HPV。
(3)抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞所分泌的抗体才是抗HPV的抗体,因此对于此类细胞需进行克隆化培养,克隆化培养的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/mL,每孔加入细胞稀释液0.1 mL,使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。
(4)抗体是由效应B细胞合成分泌的。利用无限增殖调控基因(prG)制备单克隆抗体,可以借助基因工程技术,其思路是:通过基因工程向效应B细胞中导入prG;也可以借助核移植技术,其思路是:利用核移植技术将效应B细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细胞中。