Question

【题目】PCR扩增时需考虑高质量的基因组DNA模板以及反应体系中各种成分的优化组合，相关叙述错误的是（ ）

A.反应体系中模板DNA的量和纯度影响PCR的成功与否

B.设计引物时需考虑引物的长度、碱基序列和GC含量

C.Taq酶的浓度过低会引起非特异性扩增产物量的增多

D.目标DNA的获得取决于引物在模板DNA上的结合位置

Answer 1

【答案】C

【解析】

PCR技术：

（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

（2）原理：DNA复制。

（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

A、PCR体外扩增需要DNA做模板，所以反应体系中模板DNA的量和纯度会影响PCR的成功与否，A正确；

B、设计引物时需考虑引物的长度、碱基序列和GC含量，以保证引物能与目的基因的特定序列识别，且不能出现引物之间的碱基互补配对，B正确；

C、复性温度过低会造成引物与模板的结合位点增加，非特异性产物增加，C错误；

D、由于PCR扩增需要在引物的作用下延伸子链，所以DNA聚合酶只能特异性的复制处于两个引物之间的DNA序列，即目标DNA的获得取决于引物在模板DNA上的结合位置，D正确。

故选C。