Question

【题目】下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图。请据图作答：

（1）过程①不能用人的口腔上皮细胞来完成，原因是___________。

（2）与基因组文库中提取的目的基因相比，过程②的产物由于没有_______序列，便于进行物种间的基因交流；用_________（试剂）可以检验该过程产物的化学本质。

（3）在体外得到大量DNA的PCR技术，与体内DNA复制的区别之一是反应温度不同。PCR中首先用95℃高温处理，目的是____________，而这一过程在细胞内是通过__________实现的。另外，PCR过程中使用的一对引物使大量扩增出的DNA片段具有_________________性。

（4）若⑥过程产生平末端，则⑦过程要用__________酶形成重组分子，C中标记基因的作用是____________。

Answer 1

【答案】 口腔上皮细胞中的胰岛素基因不表达（转录） 内含子 二苯胺 使DNA解旋 解旋酶 特异 T4DNA连接 用于筛选出导入了目的基因的受体细胞

【解析】试题分析：图示是利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图．图中①表示从胰岛B细胞中获取胰岛素mRNA的过程；②为逆转录过程，A为胰岛素基因；③④⑤表示目的基因的扩增过程；⑥表示用限制酶切割运载体形成黏性末端的过程；⑦表示基因表达载体的构建过程；⑧表示将目的基因导入受体细胞的过程；⑨表示目的基因随着受体细胞的增殖和扩增；⑩是从培养液中获取胰岛素的过程。

（1）①过程是从胰岛细胞中获取胰岛素mRNA的过程，由于在基因表达是选择性表达的，人的肝脏细胞中不转录出胰岛素mRNA，因此不能利用人的肝脏细胞来完成①过程。

（2）②为逆转录过程或反转录过程，以mRNA形成DNA的过程，产物DNA中不含有内含子。在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂，因此可以用二苯胺检验该过程产物的化学本质。

（3）PCR中首先用95℃高温处理，目的是打开两条链之间的氢键，使DNA解旋（两条链解开螺旋），在细胞内是通过解旋酶使氢键断裂。PCR过程中的引物实质是单链DNA，可以与一段模板链发生碱基互补配对，因此大量扩增出的DNA片段具有特异性。

（4）⑦过程是构建基因表达载体的过程，要用到DNA连接酶连接目的基因和运载体，从而形成重组分子。标记基因的作用是用于筛选出导入了目的基因的受体细胞。