题目内容
【题目】[生物——选修3:现代生物科技专题]Bt基因即是苏云金芽胞杆菌（Badcillus thuringiensis，简称Bt)基因，因其表达产物Bt毒蛋白杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的转杀虫基因。下图为培育转Bt基因苗的基本操作过程。
(1)Bt基因可从构建的Bt基因组文库中获取，也可以从其cDNA文库中获取，从前者获取的基因______(填“含有”或“不含有”)启动子。若利用PCR技术从cDNA文库中获取Bt基因（基因序列未知），需根据Bt蛋白氨基酸序列设计引物，引物的序列可以有多种，原因是_____________.在PCR体系中需加入其中的____(填“全部”或“任意1种”或“其中2种”)引物，若Bt基因序列已知，则引物的序列通常为_____种。
(2)在构建基因表达载体的过程中，为了方便筛选含有目的基因的细胞，作为运载体的Ti质粒应含有_____基因，其中________是驱动基因转录的酶识别和结合的位点，而能帮助目的基因整合到宿主细胞染色体上的序列称为____________。图示将目的基因导入受体细胞的方法是_________________。
(3)步骤Ⅳ中产生的细胞团称为____________,步骤Ⅳ和Ⅴ过程要注意控制培养基中___________的浓度比例，以便获得幼苗。
【答案】 含有 一种氨基酸可能有多种密码子，对应生物DNA碱基序列就会有多种 全部 2 标记基因（抗性基因） 启动子 T-DNA（可转移DNA） 农杆菌转化法 愈伤组织 生长素与细胞分裂素
【解析】试题分析：本题图文结合的形式综合考查学生对基因工程及其应用的掌握情况。梳理基因工程的基本操作步骤、植物组织培养的过程，通过提取图中的信息并结合题意进行相关试题的解答。
(1) 基因组文库是指含有某种生物全部基因随机片段的重组DNA克隆群体，因此从基因组文库中获取的Bt基因含有启动子。根据Bt蛋白氨基酸序列设计引物，需先依据Bt蛋白的氨基酸序列→推测相应的mRNA的碱基序列→进而推测出Bt基因的碱基序列，再依据Bt基因的碱基序列设计引物。由于一种氨基酸可能有多种密码子，对应生物DNA碱基序列就会有多种， 所以根据Bt蛋白氨基酸序列设计的引物序列可以有多种。由于从cDNA文库中获取的Bt基因序列未知，因此在PCR体系中需加入其中的全部引物；若Bt基因序列已知，则引物的序列通常为2 种。
(2) 在构建基因表达载体的过程中，为了方便筛选含有目的基因的细胞，作为运载体的Ti质粒应含有标记基因（抗性基因）基因。启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点。Ti质粒中的T-DNA（可转移DNA）能帮助目的基因整合到宿主细胞染色体上。图示将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法。
(3) 步骤Ⅳ中经过脱分化产生的细胞团称为愈伤组织，步骤Ⅳ至Ⅴ过程为再分化，要注意控制培养基中生长素与细胞分裂素的浓度比例，以便获得幼苗。
