题目内容
【题目】菊天牛是菊花的最主要的害虫，科研人员将抗虫基因转入菊花培育出抗虫菊花，下图是获得转基因菊花的技术流程。请回答下列问题：
注:卡那酶素抗性基因（kanR)为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感
(1)利用PCR技术扩增抗虫基因时，需用耐高温的___________催化，PCR—般要经历三十次以上的循环，每次循环包括_____________三步。
(2)常用Ca2+处理土壤农杆菌，其目的是______________。重组Ti质粒整合到菊花叶肉细胞的________上。
(3)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及_________的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。检验转基因菊花的抗虫性状，常用的方法是______________。
(4)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫，实验组饲喂转基因植株，对照组应饲喂等量的正常植株。实验结果显示，实验组的害虫死亡率明显高于对照组，说明__________。
【答案】 热稳定DNA聚合酶（或Taq酶） 变性、复性和延伸 提高受体细胞的转化率（或使之成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞） 染色体 卡那霉素 在转基因菊花上投放菊天牛 转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用
【解析】试题分析：分析题图：图示为获得转基因菊花的技术流程图，目的基因（抗虫基因）和质粒构建基因表达，采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞，再采用植物组织培养技术将受体细胞培养成转基因植株。
（1）PCR技术中，因需要高温解旋，故需用耐高温的DNA聚合酶催化，每次循环包括变性、复性和延伸三个步骤。
（2）将目的基因导入植物细胞时，常采用感受态细胞法，即用Ca2+（或CaCl2）处理农杆菌细胞，使其处于易于吸收周围环境中的感受态。农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。
（3）由图可知，标记基因是卡那霉素抗性基因，因此可用含有卡那霉素的培养基来筛选转基因菊花。检验转基因菊花的抗虫性状，常用方法是投放菊天牛，若菊天牛大量死亡，说明转基因成功。
（4）实验组的害虫死亡率明显高于对照组，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
