题目内容
【题目】某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后,尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验。通过查阅资料,制订了以下的实验方案:
(实验课题)酵母RNA的提取和鉴定。
(实验目的)1.从酵母中提取RNA;2.鉴定RNA。
(实验原理)微生物是工业上大量生产RNA的原料,其中以酵母尤为理想,因为酵母核酸中主要是RNA,DNA很少,菌体易收集,RNA易分离。RNA不溶于乙醇和无水乙醚,RNA热稳定性较蛋白质强。利用稀碱法(稀碱能使细胞壁溶解)或高盐法(高浓度的盐改变细胞膜的通透性)来释放RNA。RNA水解液(加硫酸、加热)+苔黑酚-FeCl3试剂加热直到沸腾1分钟,会呈现墨绿色。
(实验材料)干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等;0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl3试剂等。
(实验步骤)
①称6克干酵母
②加0.2%氢氧化钠45mL,沸水加热20分钟,搅拌,后加乙酸7滴
③离心10分钟后取上清液
④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟
⑤离心后先用95%乙醇洗两次,再用无水乙醚洗两次
⑥获得RNA粗制品
⑦RNA鉴定
请根据实验方案,思考并回答下列问题:
(1)酵母菌细胞中的RNA主要分布在____中,酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料,理由是____。
(2)实验步骤⑤中,离心后取____(填“上清液”或“沉淀物”)用乙醇、无水乙醚进行洗涤。
(3)RNA提取过程要注意温度的控制,在20~70℃的温度范围内停留的时间不能太长,其原因是____;
(4)稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的,一是____,二是____,以便获得更多更纯净的RNA。
(5)若用花椰菜来提取DNA,可用____瓦解细胞膜,然后充分研磨,实验中研磨速度要____。
【答案】细胞质 酵母菌在有氧和无氧条件下都能生存,属于兼性厌氧型 沉淀物 分解核酸的酶在此温度范围内活性高,会使RNA降解 使杂质蛋白质变性 使核酸水解酶失活,减少RNA的分解 洗涤剂 缓慢
【解析】
真核细胞中RNA在细胞核内合成,由核孔进入细胞质基质,tRNA分布在细胞质基质中,作用是能识别并转运氨基酸到核糖体上,rRNA为核糖体的组成成分,mRNA作为翻译的模板与核糖体结合,线粒体和叶绿体内也含有RNA,因此酵母菌细胞中含有RNA的结构有细胞核、线粒体、核糖体、细胞质基质。
(1)据分析可知,酵母菌细胞中的RNA主要分布在细胞质中,酵母菌是兼性厌氧型生物,在无氧和有氧条件下均可进行细胞呼吸,呼吸产物容易获得并进行定性测量,便于探究细胞呼吸方式。
(2)实验步骤⑤中,RNA分子大,且不溶于乙醇和无水乙醚,因此离心后存在于沉淀物中,且可以用乙醇、无水乙醚洗涤,除去杂质。
(3)RNA提取过程要注意温度的控制,在20~70℃的温度范围内停留的时间不能太长,其原因是分解核酸的酶在此温度范围内活性高,会使RNA降解。
(4)稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的,一是使杂质蛋白质变性,二是使核酸水解酶失活,减少RNA的分解,以便获得更多更纯净的RNA。
(5)若用花椰菜来提取DNA,可用洗涤剂瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。然后充分研磨,实验中研磨速度要缓慢,防止DNA分子断裂。
【题目】下表是某学生设计的有关实验方案。据表分析,下列说法正确的是
组别 | ① | ② | ③ | ④ | ⑤ | ⑥ |
质量分数为3%的淀粉溶液(mL) | 2 | - | 2 | - | 2 | - |
质量分数为3%的蔗糖溶液(mL) | - | 2 | - | 2 | - | 2 |
质量分数为2%的α-淀粉酶溶液(mL) | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
反应温度(℃) | 0 | 0 | 60 | 60 | 100 | 100 |
检测试剂Y | 2滴 | 2滴 | 2滴 | 2滴 | 2滴 | 2滴 |
注:表中“-”表示没有添加。
A.本实验检测试剂Y可用碘液或斐林试剂
B.①②两组实验可用于验证酶的专一性
C.若Y设置正确,则②④⑥三组实验可说明温度能影响酶活性
D.若Y设置正确,则α-淀粉酶溶液的用量是无关变量
【题目】过氧化物酶能分解H2O2,氧化焦性没食子酸呈橙红色。为探究白菜梗中是否存在过氧化物酶,设计实验如下表。下列相关叙述正确的是
管号 | 1%焦性没食子酸/mL | 2%H2O2/mL | 缓冲液/mL | 过氧化物酶溶液/mL | 白菜梗提取液/mL | 煮沸冷却后的白菜梗提取液/mL |
1 | 2 | 2 | 2 | — | — | — |
2 | 2 | 2 | — | 2 | — | — |
3 | 2 | 2 | — | — | 2 | — |
4 | 2 | 2 | — | — | — | 2 |
A.1号管为对照组,其余不都是实验组
B.2号管为对照组,其余都为实验组
C.若3号管显橙红色,无需对照就能证明白菜梗中存在过氧化物酶
D.若4号管不显橙红色,说明白菜梗中无过氧化物酶
【题目】番茄果实颜色由一对基因A、a控制,下表杂交实验及结果。分析正确的是( )
实验组 | 亲本表现型 | F1代红果 | F1代黄果 |
1 | 红果×黄果 | 492 | 504 |
2 | 红果×黄果 | 997 | 0 |
3 | 红果×红果 | 1511 | 508 |
4 | 黄果×黄果 | 0 | 963 |
A.实验3可证明黄色为显性性状,实验4则不能
B.实验1的亲本基因型:红果为Aa,黄果为aa,相当于测交
C.实验2的F1代红果中既有纯合子也有杂合子
D.实验1的F1代红果与实验2的F1代红果杂交,后代中红果占2/3