题目内容
【题目】【生物——选修1：生物技术实践】
下图为银川环保部门对艾依河段的大肠杆菌进行检测的操作和配方图。据图回答下列相关问题：
（1）图甲中滤膜的孔径应__________（填“大于”或“小于”）大肠杆菌。
（2）配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐和琼脂以外，还应加入__________。待各成分都熔化后,调整pH和灭菌，待冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近___________。大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长呈黑色菌落，从功能上划分，该培养基属于_________培养基。
（3）用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是_________。
（4）要检测样液中的大肠杆菌含量，取1ml河水样本，加入4ml无菌水，充分混匀后，在3个平板上用涂布平板法分别接入0.1ml样液，在37℃的培养箱中放置48小时，3个平板上的黑色菌落数分别为51、50、49。据此可得出1ml河水样本中活菌数为______个。
（5）该小组通过统计菌落的数目，计算出单位体积样品中大肠杆菌数目，理论上他们的统计值比实际值_______（偏高/偏低），理由是_______________。
【答案】 小于 氮源（蛋白胨） 倒平板 鉴别（鉴定） 将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落 2.5×103（或2500） 偏低 两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落
【解析】【试题分析】
1．对不耐高温的试剂，可以用滤膜过滤除菌。图甲中为了在滤膜上获得大肠杆菌，滤膜的孔径应小于大肠杆菌。
2．作为基础培养基，其营养成分应能满足微生物生长的需要，都应含有水、无机盐、碳源（提供碳元素的物质）和氮源（提供氮元素的物质）等。
3.鉴别培养基是根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同种类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来鉴别大肠杆菌等细菌。
4.每mL样品中的菌落数＝(C÷V) ×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。
（1）图甲中滤膜的孔径应小于大肠杆菌，滤膜过滤才能获得大肠杆菌。
（2）培养基应该满足微生物生长需要，因此配制图乙中的基础培养基时除了水分、无机盐和琼脂以外，还应加入氮源；待各成分都熔化后,调整pH和灭菌，待冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板；大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长呈黑色菌落，从功能上划分，该培养基属于鉴别（鉴定）培养基。
（3）用平板划线法分离样液中的大肠杆菌的操作中，为了将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落，需要在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。
（4）根据题意可知，涂布平板时所用的稀释液的稀释倍数M＝5，3个平板上的黑色菌落平均数C＝(51＋50＋49) ÷3＝50，涂布平板时所用的稀释液的体积V＝0.1mL。根据公式可知，1ml河水样本中活菌数＝(C÷V)×M＝(50÷0.1)×5＝2.5×103（或2500）个。
（5）若两个或多个大肠杆菌连在一起时，平板上只能观察到1个菌落，因此理论上该小组的统计值比实际值偏低。
应用题作业本系列答案
