题目内容
【题目】胰岛素是治疗糖尿病的重要激素，利用大肠杆菌合成的人胰岛素是第一种基因工程药物。回答下列问题：
（1）首先应从人的______细胞中提取mRNA，通过反转录法获得cDNA，在______酶的作用下形成重组质粒，再导入经过______处理的大肠杆菌。
（2）不能直接提取人胰岛素基因导入大肠杆菌生产胰岛素，从基因结构分析，主要原因是______。
（3）为大规模培养目的菌株，需要从cDNA文库中获取目的基因。先把大肠杆菌涂平板，再将得到的菌落“复印”到薄膜上。薄膜上的细菌原位溶菌，再将其DNA变性，与放射性同位素标记的人胰岛素基因杂交，洗去未结合的过剩探针。应挑选图中的菌落______（填“Ⅰ”或“Ⅱ”）进行大规模培养。这种检测方法称为______技术。
（4）一些制药公司用转基因的酵母菌来生产人胰岛素，虽然产量略低，但活性比转基因大肠杆菌生产的高，原因主要是______。
【答案】胰岛B 限制酶和DNA连接酶 Ca+ 直接提取人胰岛素基因中复制原点、无表达所需的启动子、终止子 Ⅱ DNA分子杂交 酵母菌具有内质网和高尔基体，可生产出具有生物活性的胰岛素
【解析】
要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在真核细胞中稳定遗传的关键。检测的方法是采用DNA分子杂交技术，即将转基因生物的基因组DNA提取出来，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作标记，以此作为探针，使探针与基因组DNA杂交，如果显示出杂交带，就表明目的基因已插入染色体DNA中。
（1）首先应从人的胰岛B细胞中提取mRNA，通过反转录法获得cDNA，在限制酶和DNA连接酶的作用下形成重组质粒，再导入经过Ca+处理的大肠杆菌。
（2）基因工程中，不能将胰岛素合成基因直接导入大肠杆菌，胰岛素合成基因是真核细胞具有的基因，而大肠杆菌属于原核细胞，胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞中不能稳定遗传和表达，直接提取人胰岛素基因中复制原点、无表达所需的启动子、终止子。
（3）由图可知：用DNA分子杂交技术在菌落Ⅱ出现了杂交带，故应挑选图中的菌落Ⅱ进行大规模培养。
（4）基因的表达包括基因的转录和翻译，胰岛素合成基因在大肠杆菌细胞内表达时，遗传信息的传递方向是DNA→（m）RNA→蛋白质。经检测，胰岛素合成基因的表达产物未能达到预期的生物活性，导致这种差异的原因可能是表达产物未经内质网、高尔基体的加工，而酵母菌具有内质网和高尔基体，可生产出具有生物活性的胰岛素。
【题目】人类ABO血型是由红细胞膜上A、B抗原决定的血清中的凝集素会与相应抗原发生特定的凝集反应。不同血型的抗原和凝集素分布如下表：
ABO血型 | 抗原类型 | 凝集素类型 |
A | A型 | 抗B凝集素 |
B | B型 | 抗A凝集素 |
AB | A型、B型 | 无 |
O | 无 | 抗A凝集素、抗B凝集素 |
欲鉴定某血样的ABO血型，设计实验如下。请完善实验步骤、预测实验结果和结论，并完成分析与讨论。
材料和用具：载玻片一个、滴管若干、抗A凝集素试剂、抗B凝集素试剂和待测血样等。
（1）实验思路：
①将抗A、抗B凝集素试剂分别滴加在载玻片的两侧（如图）。
②在抗A凝集素试剂和抗B凝集素试剂中各滴加一滴_________。
③一段时间后，观察血滴有无_________现象。
（2）结果和结论：把预期的实验结果和结论以表格的形式呈现（阳性结果用“+”表示，无阳性结果用“-”表示）_________。
（3）分析与讨论：
①为提高血型鉴定的准确率，既要用凝集素试剂检测血型，还要用已知血型的________与待检者的血清混合来检测血型。
②凝集素属于抗体，与抗原特异性结合的位点位于Y形结构的________。
③动物的抗A凝集素或抗B凝集素虽为抗体，但一般认为其产生不是通过自身抗原的刺激后经体液免疫产生的。请例举事实以支持该观点。________。