题目内容
19．Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如下图：
（1）步骤①中所选的卵母细胞应处于减数第二次分裂中（MⅡ中）期．
（2）步骤②中，分离出ES细胞比体细胞全能性高．
（3）步骤③中，首先要获取目的基因，以下几种方法中需要模板的是BC
A．从基因组文库中获取目的基因 B．利用PCR 技术扩增目的基因
C．构建cDNA 文库 D．通过DNA 合成仪利用化学方法人工合成目的基因
（4）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的基因表达载体（重组质粒）．
（5）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交．
分析 1、动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体．
2、胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）．
3、在基因工程中，目的基因和质粒需要用同种限制酶进行切割，形成相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接成重组质粒．
4、目的基因分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术
解答 解：（1）步骤①核移植中所选的卵母细胞应处于减数第二次分裂中期．
（2）胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）．故步骤②中，ES细胞在形态上表现为细胞体积小，细胞核大，核仁明显的特点，ES细胞比体细胞全能性高．
（3）利用PCR 技术扩增目的基因技术和构建cDNA文库都需要需要模板的．
（4）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的基因表达载体（重组质粒），是核心环节．
（5）基因表达的产物是蛋白质，所以提取小鼠骨髓细胞的蛋白质进行抗原-抗体杂交．
故答案为：
（1）减数第二次分裂中（MⅡ中）
（2）高
（3）BC
（4）基因表达载体（重组质粒）
（5）抗原-抗体杂交
点评 题以基因治疗的流程图为载体，考查了基因工程、细胞工程以及胚胎工程等方面的知识，难度适中．考生要能够识记细胞核移植的过程；识记囊胚包括内细胞团和滋养层两部分；明确基因工程中质粒和目的基因需要利用同种限制酶进行切割；掌握目的基因检测和鉴定的一般方法等．
练习册系列答案
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7．图为果蝇某一条染色体上的几个基因示意图，从中得到的正确结论是（ ）
| A． | 基因是DNA分子结构的基本单位 | |
| B． | R、S、N、O互为等位基因 | |
| C． | 果蝇的每个基因是由成百上千个核糖核苷酸组成的 | |
| D． | 基因是具有遗传效应的DNA片段，一条染色体上可以有多个基因 |
14．一种日本特有的蚜虫的雌性个体在其出生后半年就开始不断繁殖后代，而且在丧失繁殖能力后仍能继续分泌黏液，攻击瓢虫等天敌，与其它雌性昆虫繁殖后会死去不同，因此获得“蚜虫奶奶”美称．以下说法正确的是（ ）
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| B． | “蚜虫奶奶”现象涉及种内互助和种间斗争 | |
| C． | “蚜虫奶奶”现象可能是长期自然选择形成的 | |
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4．下列对有关实验的描述中，错误的是（ ）
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11．下列关于基因突变和基因重组的描述，正确的是（ ）
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| D． | 因为基因决定生物的性状，所以只要发生基因突变，生物的性状就一定改变 |
