Question

【题目】为获得高效降低胆固醇的乳酸菌，科研人员作了如下实验。

（1）取适量发酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入__________制成1:10稀释液，再梯度稀释到10-6的稀释液，涂布于添加了CaCO3的乳酸幼苗培养基（MRS培养基）平板上，在__________条件下恒温静置培养48小时。挑取具有__________的菌落纯化培养，通常使用的划线工具是__________。示意图A和B中__________表示的是该方法接种培养后得到的结果。可通过观察菌落的__________判断是否达到了纯化。

（2）纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养，一段时间后离心测定__________（填“上清液或沉淀细胞”）中胆固醇的含量，以____________________作为对照，测定菌株降胆固醇的能力，筛选出具有目的菌株。

Answer 1

【答案】 无菌水 无氧 溶钙圈（或“透明圈”） 接种环 A 形态、大小 上清液 未接种的高胆固醇培养液

【解析】由题意和图形可知该题考查微生物的分离和纯化相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解和应用能力。

（1）配制稀释液应该用无菌水，可以防止外来杂菌的污染，保证培养的菌种的纯度。因为培养的是乳酸菌，其是严格的厌氧型细菌，所以培养时应在无氧条件下进行培养。乳酸菌能利用CaCO3，所以应挑选具有透明圈的菌落进行纯化培养。划线接种的工具是接种环，该接种方法是在培养基上划区域，除了首次其余的都是从上次划线的末端开始，在A和B中A表示的是平板划线法，B是稀释涂布平板法。通过观察菌落的形态、大小来判断是否达到了纯化，如果菌落的形态、大小都基本相同，说明获得的菌种单一，如果出现了多种，说明没有达到纯化的目的。

（2）因为分离得到的该乳酸菌能高效降低胆固醇，所以接种到高胆固醇培养液中培养离心后要测定的是上清液中胆固醇的含量，以未接种的高胆固醇培养液作为对照，以测定菌株降胆固醇的能力。