Question

【题目】已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图．
请回答：
（1）①代表的是过程．为获得A基因表达载体，需用酶对A基因和运载体进行切割．将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是 ．
（2）利用PCR技术扩增A基因时，设计引物序列的主要依据是 ， 加入引物的作用是 ．
（3）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制等条件．
（4）过程③采用的技术是 ， 获得的X叫细胞．

Answer 1

【答案】
（1）逆转录；限制；显微注射法
（2）A基因两端的部分核苷酸序列；与A基因单链相应互补序列结合，然后再DNA聚合酶作用下进行延伸
（3）温度
（4）动物细胞融合；杂交瘤
【解析】解：（1）由以上分可知①是逆转录过程．构建基因表达载体时，首先需要用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．（2）利用PCR技术扩增A基因时，根据A基因两端的部分核苷酸序列设计引物序列，加入引物的作用是与A基因单链相应互补序列结合，然后再DNA聚合酶作用下进行延伸．（3）PCR扩增目的基因的过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．因此，与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制温度等条件．（4）③过程需要采用动物细胞融合技术，根据图中信息可知X为杂交瘤细胞． 故答案为：（1）逆转录 限制 显微注射法（2）A基因两端的部分核苷酸序列 与A基因单链相应互补序列结合，然后再DNA聚合酶作用下进行延伸（3）温度（4）动物细胞融合 杂交瘤
分析题图：图示为疫苗生产和抗体制备的流程之一，其中①表示逆转录过程；②是获取目的基因（A基因）的过程；③是细胞融合过程；X为杂交瘤细胞．