题目内容
【题目】图1为某种普通质粒的示意图，质粒上3种限制酶的酶切位点如图所示（箭头表示识别序列）。图2表示制备抗体的两个途径的模式图。
（1）据图1提供的信息，你推荐最好采用_____酶去切割质粒较为理想。
（2）图2中 ③④⑤⑥过程中的目的基因是_____。 图中获取该目的基因的方法是_____。
（3）图2中①过程形成的Y细胞称为_____细胞，过程①的原理_____。
（4）抗体2在人体内引起免疫反应，这个过程属于_____。
A．细胞免疫 B．人工免疫 C．体液免疫 D．特异性免疫
（5）过程①需要采用的生物技术是_____。通过图2中①②过程获得的抗体1属于_____工程。
A．基因工程 B．细胞工程 C．发酵工程 D．酶工程
（6）下列①～④表示转基因技术的步骤，其中步骤④是_____；根据基因工程过程请将①﹣④步骤排序以实现获取抗体2，正确排序_____。
①重组DNA分子导入大肠杆菌细胞
②筛选含目的基因的受体细胞
③人工合成目的基因
④
（7）为了检测目的基因是否导入大肠杆菌，需要进行筛选。其操作过程如下，请把下列各步填写完整：
第一步，配制培养基。除下表中的成分外，还必须添加_____。
第二步，菌液用_____法接种在第一步配制的培养基上。
第三步，选择目标菌落扩大培养。
牛肉膏 | 0.5g |
蛋白胨 | 1g |
NaCl | 0.5g |
琼脂 | 2g |
水 | 200mL |
【答案】Pst I V1 基因 化学方法人工合成（逆转录法） 杂交瘤细胞 利用了细胞膜的流动性/一定的流动性 C D 细胞融合技术 B 目的基因与运载体的连接 ③④①② 新霉素 稀释涂布法
【解析】
1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。
2、据图2分析可知，细胞A表示效应B细胞，细胞Y表示杂交瘤细胞，①过程表示动物细胞融合，②过程动物细胞培养，③过程提取信使RNA，④过程表示逆转录，⑤表示基因表达载体的构建，⑥表示导入受体细胞。
（1）切割质粒时要保证目的基因和复制原点不被破坏，因此选择限制酶Pst I 酶切割较为理想。
（2）由图可知，③④⑤⑥过程中的目的基因是V1基因。 图中获取该目的基因的方法是化学方法人工合成（或逆转录法）。
（3）过程①至②抗体的获取称为单克隆抗体，其中①是细胞融合过程，Y细胞称为杂交瘤细胞；细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性。
（4）抗体是体液免疫过程中产生的，体液免疫属于特异性免疫。
（5）过程①需要采用细胞融合技术。通过图2中①②过程获得的抗体1属于细胞工程。
（6）基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。因此，步骤④是目的基因与运载体的连接，正确排序③④①②。
（7）用限制酶Pst I 酶切割会破坏氨苄青霉素抗性基因，但没有破坏新霉素基因，因此配制培养基时，除下表中的成分外，还必须添加新霉素。菌液用稀释涂布法接种在第一步配制的培养基上
