题目内容
【题目】微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有关微生物的知识，分析回答问题：
（1）培养基的制备需要经过计算→称量→溶化→ _________→倒平板，若所用培养基为固体培养基，则应该加入_________，熔化时需要边加热边搅拌，原因是_________________________。
（2）分离纯化后对细菌进行计数，一般采用__________________（方法）接种，此种方法估算值往往比实际值偏_______。
（3）微生物纯化培养过程中，无菌操作至关重要，操作是否符合无菌要求，可以通过观察_______________。
（4）为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的________，培养基中加入________指示剂培养后，若变红则其中含有所需细菌。
【答案】灭菌 琼脂 防止琼脂糊底，使烧杯破裂 稀释涂布平板法 小 培养基上生长菌落的颜色、形状、大小、隆起程度是否一致 氮源 酚红
【解析】
培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等。
常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
常用的灭菌方法：干热灭菌法、灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法。
（1）培养基的制备过程需要经过高压蒸汽灭菌处理，若制备固体培养基，应该加入琼脂，为了防止琼脂糊底，使烧杯破裂，熔化时需要边加热边搅拌。
（2）稀释涂布平板法可以对细菌进行计数，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。
（3）微生物纯化培养过程中，可以通过观察培养基上生长菌落的颜色、形状、大小、隆起程度是否一致，来判断操作是否符合无菌要求。
（4）为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的氮源，在该培养基上只有能利用尿素的微生物才能存活。若培养基上有尿素分解菌，尿素分解菌能将尿素分解为氨，使pH升高，加入酚红指示剂后会变红。
