题目内容
【题目】下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素的抗性基因。
(1)基因工程中使用的限制酶,其特点是_________。
(2)将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接,连接后获得的质粒类型有 。(多选)
①X-1 ②X-2 ③X-3 ④X-4
(3)若将上图所示X—1、X—2、X—3、X—4四种质粒导入大肠杆菌,然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有 。
(4)如果X-1用E1酶切,产生850对碱基和3550对碱基两种片段:那么质粒X-2(Tcr基因的长度为1200对碱基)用E2酶切后的片段长度为 对碱基。
【答案】(1)特异性地识别和切割DNA
(2)①②③
(3)无质粒细胞和含X-3的细胞
(4)4750
【解析】
试题分析:(1)基因工程中使用的限制酶,其特点是特异性地识别和切割DNA。
(2)用限制酶E1切开质粒X-1后,质粒X-1暴露出两个粘性末端,APr被切下.两端用E1切开的Tcr基因含有与上述切割后的质粒X-1,Apr含有相同的粘性末端,混合后可形成X-1、X-2和X-3。
(3)含质粒X-1的细胞可在含青霉素培养基上生长,含质粒X-2的细胞可在含四环素培养基上生长;含质粒X-3的细胞不含抗性基因,不能在两种培养基上生长;不含有质粒的细胞也不能在两种培养基上生长。
(4)X-2的长度为1200+3550=4750,用E2酶切后质粒由环状变为链状。

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