Question

【题目】下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别位点，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。

（1）基因工程中使用的限制酶，其特点是_________。

（2）将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接，连接后获得的质粒类型有 。（多选）

①X-1 ②X-2 ③X-3 ④X-4

（3）若将上图所示X—1、X—2、X—3、X—4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养基上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有 。

（4）如果X-1用E1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片段：那么质粒X-2（Tcr基因的长度为1200对碱基）用E2酶切后的片段长度为 对碱基。

Answer 1

【答案】（1）特异性地识别和切割DNA

（2）①②③

（3）无质粒细胞和含X-3的细胞

（4）4750

【解析】

试题分析：（1）基因工程中使用的限制酶，其特点是特异性地识别和切割DNA。

（2）用限制酶E1切开质粒X-1后，质粒X-1暴露出两个粘性末端，APr被切下．两端用E1切开的Tcr基因含有与上述切割后的质粒X-1，Apr含有相同的粘性末端，混合后可形成X-1、X-2和X-3。

（3）含质粒X-1的细胞可在含青霉素培养基上生长，含质粒X-2的细胞可在含四环素培养基上生长；含质粒X-3的细胞不含抗性基因，不能在两种培养基上生长；不含有质粒的细胞也不能在两种培养基上生长。

（4）X-2的长度为1200+3550=4750，用E2酶切后质粒由环状变为链状。