Question

【题目】已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同，但细菌Ⅰ能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌Ⅱ能分解有机物B而不能分解有机物A。现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如图。

（1）步骤一使用的是牛肉膏蛋白胨培养基，其中含有细菌生长所需的水、_____等营养物质（至少写出3种）；该培养基是_____。

A．固体培养基 B．液体培养基 C．通用培养基 D．选择培养基

（2）步骤一采用_____接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的_____，最终可能得到纯种的细菌；步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是_____。

（3）无论是培养基（液），接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是_____。

（4）步骤三中，若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，预测可能的结果并推测结论：

①A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ，两者未分离。

②_____。

③_____。

（5）经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量测定结果都如题中①的情况，则应_____，再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止。

Answer 1

【答案】无机盐、碳源、氮源 B、C、D 划线法 菌落 筛选、分离两种类型的细菌 防止杂菌污染 A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ 重复步骤1和步骤2

【解析】

1．培养基的概念、种类及营养构成
（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。

（3）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
2．无菌技术
（1）关键：防止外来杂菌的入侵。
（2）具体操作
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。
3、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
4、接种方法：平板划线法和稀释涂布法。

（1）培养细菌的牛肉膏蛋白胨培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐、生长因子等，该培养基是通用培养基或液体培养基或选择培养基，故选BCD。

（2）由图可知，步骤一采用平板划线法接种，可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可能形成单个、独立的菌落，最终可能得到纯种的细菌；步骤二各瓶中的培养基加入了A、B两种有机物的目的是筛选、分离两种类型的细菌。
（3）接种前除了要调节pH外，都必须对培养基进行灭菌；接种时必须在超净工作台及酒精灯火焰附近操作，原因是防止杂菌污染。
（4）若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定：若A与B两种化合物含量都明显下降，说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ，说明两者未分离；若A含量明显下降，而B含量几乎未变，则得到细菌Ⅰ；若B含量明显下降，而A含量几乎未变，则得到细菌Ⅱ。
（5）经步骤三后，若所有瓶中培养液的A、B化合物含量都下降，说明两种细菌还未分开，则需要重复步骤一和步骤二，再测定各瓶中A、B两种化合物的含量，直到分别获得每种类型细菌为止。