题目内容

【题目】下列 DNA 片段中,加入 T4DNA 连接酶后, 在适宜的条件下不可以连接在一起的组合选项是(

选项

片段1

片段2

A


B

C

D

A.AB.BC.CD.D

【答案】A

【解析】

根据酶的来源不同,可以将DNA 连接酶分为两类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为coli DNA连接酶;另一类是从T4噬菌体中分离出来的,称为T4DNA连接酶。这两类酶都是将双链DNA片段缝合起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,但这两种酶的作用有所差别:coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,不能将双链DNA片段平末端之间进行连接;而T4DNA连接酶既可以缝合双链DNA片段互补的黏性末端,又可以缝合双链DNA片段的平末端,但连接平末端之间的效率比较低。

A、片段12为不互补的黏性末端,不可以连接在一起,A错误;

BC、片段12为均为平末端,可以连接在一起,BC正确;

D、片段12为互补的黏性末端,可以连接在一起,D正确。

故选A

练习册系列答案
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【题目】萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用,而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药,做了相关研究。

1)研究者用_________酶处理蛋白A基因和pET质粒,得到重组质粒,再将重组质粒置于感受态大肠杆菌细胞悬液中,获得转基因大肠杆菌。

2)检测发现,转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低,研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好,因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物(引物BC中都替换了一个碱基),并按图2方式依次进行4PCR扩增,以得到新的蛋白A基因。

①这是一种定点的_________技术。

②图2所示的4PCR应该分别如何选择图1中所示的引物?请填写以下表格(若选用该引物划“”,若不选用该引物则划“×”)_________

引物A

引物B

引物C

引物D

PCR1

PCR2

PCR3

PCR4

3)研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒、_________pET质粒分别导入大肠杆菌,提取培养液中的蛋白质,用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物,判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性,研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上,培养一段时间后,比较抑菌圈的大小,以确定表达产物的____________

4)作为微生物农药,使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌,其优点是_________

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