题目内容
【题目】探究二氯二乙胺能否抑制癌细胞增殖的实验:
材料用具:肝部长有肿瘤的小鼠,不同浓度的二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血球计数板,试管,吸管等.
(1)实验步骤:
a.取洁净的培养皿一个,加入适量培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用胰蛋白酶处理,使其分散开来,置于培养皿中培养;
b.取洁净的试管5支,加人等量培养液,编号1,2,3,4,5,并在1﹣4号试管中加入等量的不同液度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入 ;
c.从培养皿中吸取等量的培养液置于1﹣5号试管中,振荡后,在适宜条件下培养一段时间;
d.从静置的5支试管中吸取适量的培养液置于血球计数板上,在显微镜下计数,记录数据.
实验分析,
①该实验的实验组是号试管.上述实验步骤d中测量到的数据是否准确,请判断并作出解释 .
②另有同学按照正确的方法进行实验,得到如图结果:
根据以上实验结果,你能得出的结论有:二氯二乙胺能抑制癌细胞增殖,且在一定范围内,随二氯二乙胺浓度的增大,抑制作用 .
【答案】
(1)等量生理盐水;1~4;取样前培养液没有摇匀;逐渐增强
【解析】解:b.取洁净的试管5支,加入等量培养液,编号1、2、3、4、5,并在1~4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入等量生理盐水.
①该实验的实验组是1~4号试管.取样前培养液没有摇匀,故上述实验步骤d中测量到的数据不准确.②根据实验结果,能得出的结论是二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,在一定范围内,随二氯二胺浓度的增大,抑制作用逐渐增强.
所以答案是:等量生理盐水 ①1~4 不准确,取样前培养液没有摇匀②逐渐增强
【考点精析】通过灵活运用动物细胞与组织培养过程,掌握取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养即可以解答此题.
【题目】下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1,图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注.请回答下列问题:
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
识别序列及切割位点 |
(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过酶作用后获得重组质粒.为了扩增重组质粒,需将其转入处于态的大肠杆菌.
(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中 .
(3)若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为 , 对于该部位,这两种酶(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开.
(4)若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得种大小不同的DNA片段.