Question

【题目】根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤： 、 、 、 。

（2）在基因工程的操作过程中需要用到两种工具酶——限制酶和DNA连接酶。其中限制酶能切割ＤＮＡ分子切割后产生 末端和 末端；DNA连接酶能将目的基因和载体连接起来，按其来源不同可分为两类，即 和 。

（3）质粒载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 。

（4）基因工程中常用的载体有质粒、 和 。

Answer 1

【答案】（1）目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定

（2）黏性 平（两空可调换位置） Ｔ４DNA连接酶 Ｅ．coli DNA连接酶（两空可调换位置）

（3）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同（或碱基互补配对）

（4）动植物病毒 λ噬菌体的衍生物（两空可调换位置）

【解析】

试题分析：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是目的基因的检测与表达。

（2）在该技术中，切割DNA的工具是限制酶，它能识别某一特定核苷酸序列，使两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开．限制酶切割产生的DNA片段末端有两种形式，分别是黏性末端、平末端；基因工程中常用“分子缝合针”是连接酶，根据酶的来源不同可分为Ecoli连接酶、T4DNA连接酶两类，其中前者只可以连接黏性末端，后者既可以连接黏性末端，也可以连接平末端。

（3）两种不同酶切割之后便于相连，所产生的黏性末端必须相同．因此为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同。

（4）基因工程中除质粒外，动植物病毒和λ噬菌体的衍生物也可作为运载体。