题目内容
【题目】利用基因工程生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图所示，下列叙述不正确的是（ ）
A.过程①是在小菜蛾细胞的细胞核中进行
B.过程②获取的CarE基因中不含有启动子
C.过程③进行前需要用Ca2+处理大肠杆菌
D.过程④可以利用DNA分子杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞
【答案】A
【解析】
根据题意和图示分析可知：图中过程①表示通过反转录法合成相应的DNA；过程②表示利用PCR技术对目的基因进行扩增；过程③表示将目的基因导入受体细胞；过程④表示通过筛选获得工程菌。
A、过程①表示通过反转录法合成目的基因，该过程是在体外进行的，不是在小菜蛾细胞的细胞核中进行的，A错误；
B、目的基因是通过逆转录法获得的，该方法获得的目的基因不含启动子，因此过程②获取的CarE基因中不含有启动子，B正确；
C、将目的基因导入大肠杆菌细胞时采用感受态转化法，感受态细胞可用CaCl2溶液处理后制备，C正确；
D、过程④可以利用DNA分子杂交技术鉴定目的基因是否已导入受体细胞，D正确。
故选A。
【题目】萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。
（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。
（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。
①这是一种定点的_________技术。
②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____
引物A | 引物B | 引物C | 引物D | |
PCR1 | ||||
PCR2 | ||||
PCR3 | ||||
PCR4 |
（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。
（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。
【题目】淀粉酶在食品加工及轻工业生产中具有广泛用途。研究人员从细菌中克隆了一种淀粉酶基因，为了获得高产淀粉酶菌株，按下图所示流程进行基因工程操作。
（1）将淀粉酶基因与质粒载体重组时需要使用的酶包括_________ 。
（2）大肠杆菌经过_________ 处理后，可作为重组载体的宿主（感受态）细胞使用。
（3）为了初步筛选高产菌株，研究人员将得到的3个工程菌株接种到以淀粉为唯一碳源的培养基上，经过培养后用稀碘液处理，可观察到由于淀粉被分解，在平板上形成以菌落为中心的透明圈。测量不同菌株形成的菌落及透明圈直径，结果见下表。
工程菌 | 菌落直径（C，mm） | 透明圈直径（H，mm） | H/C |
菌株Ⅰ | 8.1 | 13.0 | 1.6 |
菌株Ⅱ | 5.1 | 11.2 | 2.2 |
菌株Ⅲ | 9.5 | 17.1 | 1.8 |
①表中菌落直径（C）的大小反映了__________，透明圈直径（H）的大小反映了_____________。
②根据表中数据，可推断其中淀粉酶产量最高的菌株是_______ 。
（4）基因工程技术已成功应用于人类生产生活中的诸多方面。请从植物育种或人类疾病预防与治疗方面举一实例，并说明制备该转基因产品的基本技术流程。（限100字以内）___________________