Question

【题目】科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图，请回答下列问题：

（1）图中卵母细胞应在体外培养到______期，步骤①应先对卵母细胞进行______处理。

（2）由图可知，步骤②要分离出ES细胞，需将重组胚胎培养到______期。

（3）步骤③选择ES细胞作为受体细胞而不是上皮细胞，是因为ES细胞______，该过程需要先利用______技术扩增干扰素基因，其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成______。

（4）步骤④应在培养液中加入______。为检测干扰素基因是否在小鼠体内成功表达，可以采用______技术。

Answer 1

【答案】MII中（减数第二次分裂中） 去核 囊胚 在功能上具有发育的全能性 PCR 引物 分化诱导因子 抗原-抗体杂交

【解析】

分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的流程，其中①表示获得重组细胞的过程；②表示早期胚胎培养过程；③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞。

（1）过程①获得重组胚胎之前需要通过核移植技术获得重组细胞，接受细胞核的去核卵母细胞应该处于MⅡ期。

（2）ES细胞可以从囊胚的内细胞团中分离出来。

（3）步骤③选择ES细胞作为受体细胞，是因为ES细胞在功能上具有发育的全能性；将目的基因导入受体细胞前，需要构建含有目的基因（干扰素基因）的表达载体。PCR技术可在体外大量扩增目的基因，其前提是要有一段已知干扰素基因的核苷酸序列以便合成引物。

（4）步骤④应在培养液中加分化诱导因子。为检测目的基因的表达情况，可采用抗体-抗原杂交技术，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达。