题目内容
【题目】人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如图所示，下列叙述不正确的是（ ）
A. 构建重组表达载体过程中需用同种限制酶和DNA连接酶
B. 将重组表达载体导入受精卵常用的方法是农杆菌转化法
C. 采用DNA分子杂交技术检测目的基因是否已导入受体细胞
D. 若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA，说明目的基因成功表达
【答案】B
【解析】
DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体；将目的基因导入植物细胞，采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等；将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射技术，此方法的受体细胞多是受精卵。为检测目的基因是否导入受体细胞，常用的检测方法有：①检测转基因生物DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。
A. htPA基因与载体需要用同种限制性核酸内切酶切割，形成相同的黏性末端，然后再通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体，A正确；
B. 将重组表达载体导入受精卵常用的方法是显微注射法，B错误；
C. 采用DNA分子杂交技术可检测目的基因是否已导入受体细胞，C正确；
D. 若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA，说明目的基因成功表达，D正确。
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