题目内容
【题目】[生物——选修3:现代生物科技专题]
根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有 和 。
(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:
为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是 。
(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即 DNA连接酶和 DNA连接酶。
(4)反转录作用的模板是 ,产物是 。若要在体外获得大量反转录产物,常采用 技术。
(5)基因工程中除质粒外, 和 也可作为运载体。
(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是 。
【答案】(1)平末端(1分) 粘性末端 (1分)
(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (2分)
(3)T4 (1分) Ecoli (1分)
(4)mRNA (2分) 单链DNA (2分) PCR(聚合酶链式反应)(1分)
(5)动植物病毒 (1分) λ噬菌体的衍生物 (1分)
(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 (2分)
【解析】
试题分析:(1)限制性内切酶在它识别序列的中心轴线处切割DNA分子后产生的是平末端,而在在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切割后产生的是黏性末端。
(2)若用不同的限制酶切割运载体与含有目的基因的DNA片段,只有切割后运载体与目的基因产生的黏性末端相同,才能使运载体与目的基因相连。因此质粒运载体用EcoRⅠ切割后,为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同的另一种限制性内切酶切割。
(3)根据酶的来源不同,DNA连接酶分为两类: 一类是从T4噬菌体中分离出来的,称为T4DNA连接酶,另一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为E·coli DNA连接酶。
(4)反转录是以mRNA为模板来合成DNA的过程,因此反转录作用的模板是mRNA,产物是单链DNA。可以在体外短时间内大量扩增DNA的技术叫PCR(多聚酶链式反应)技术,所以若要在体外获得大量反转录产物,常采用PCR(聚合酶链式反应)技术。
(5)基因工程中的运载体除质粒外,还有动植物病毒、λ噬菌体的衍生物等。
(6)大肠杆菌细胞外有细胞壁和细胞膜,能阻止其他物质的进入,导致未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 ,所以一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞。