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【题目】[生物——选修3:现代生物科技专题]

根据基因工程的有关知识,回答下列问题:

(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有

(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:

为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是

(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即 DNA连接酶和 DNA连接酶。

(4)反转录作用的模板是 ,产物是 。若要在体外获得大量反转录产物,常采用 技术。

(5)基因工程中除质粒外, 也可作为运载体。

(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是

【答案】(1)平末端(1分) 粘性末端 (1分)

(2)切割产生的DNA片段末端与EcoR切割产生的相同 (2分)

(3)T (1分) Ecoli (1分)

(4)mRNA (2分) 单链DNA (2分) PCR(聚合酶链式反应)(1分)

(5)动植物病毒 (1分) λ噬菌体的衍生物 (1分)

(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 (2分)

【解析】

试题分析:(1)限制性内切酶在它识别序列的中心轴线处切割DNA分子后产生的是平末端,而在在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切割后产生的是黏性末端

(2)若用不同的限制酶切割运载体与含有目的基因的DNA片段,只有切割后运载体与目的基因产生的黏性末端相同才能使运载体与目的基因相连因此质粒运载体用EcoRⅠ切割后为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用切割产生的DNA片段末端与EcoR切割产生的相同的另一种限制性内切酶切割

(3)根据酶的来源不同DNA连接酶分为两类: 一类是从T噬菌体中分离出来的称为TDNA连接酶一类是从大肠杆菌中分离得到的称为E·coli DNA连接酶。

(4)反转录是以mRNA为模板来合成DNA的过程,因此反转录作用的模板是mRNA,产物是单链DNA。可以在体外短时间内大量扩增DNA的技术叫PCR(多聚酶链式反应)技术,所以若要在体外获得大量反转录产物,常采用PCR(聚合酶链式反应)技术。

(5)基因工程中的运载体除质粒外,还有动植物病毒λ噬菌体的衍生物等。

(6)大肠杆菌细胞外有细胞壁和细胞膜,能阻止其他物质的进入,导致未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 ,所以一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞

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