Question

【题目】中国仓鼠卵巢细胞（CHO细胞）能够高效表达外源基因。科学研究中常使用重组CHO细胞（导入了重组载体的CHO细胞）大量生产外源蛋白，一般步骤为：Ⅰ.长期传代培养，获得大量重组细胞；Ⅱ.批式培养，获得大量外源蛋白。

（1）体外培养动物细胞的基本培养液（BM）中除抗生素和一般营养物质外，还应含有_______。为了获得能生产抗体A的重组 CHO 细胞，需要将含有抗体A基因的重组载体通过________法导入CHO细胞，经筛选获得重组CHO 细胞。

（2）研究发现，酵母抽提物（YE）在动物细胞培养和促进蛋白质表达中具有重要作用。为确定YE在不同培养阶段的使用策略，研究人员进行了下列实验。

①图1所示实验探究了在长期传代培养阶段________对重组CHO细胞增殖以及抗体A表达量的影响。通过细胞计数和计算得出实验结果如图2所示，结果说明________。此处理对后续批式培养中的细胞增殖及单个细胞的抗体产量基本无影响。

②进一步探究YE对批式培养阶段的影响，应在阶段Ⅰ、Ⅱ分别使用___________和________进行培养。结果表明，抗体A的总产量随着 YE 浓度的提高而增加。

③综上所述，为提高抗体A的总产量，整个培养过程中对YE的使用策略是________。

Answer 1

【答案】 动物血清 显微注射 不同浓度的YE 较低浓度YE促进细胞增殖，较高浓度YE抑制细胞增殖 BM 添加不同浓度YE的BM 传代培养过程中添加低浓度YE，批式培养过程中添加高浓度YE

【解析】试题分析：本题考查基因工程、细胞工程，考查对基因工程操作步骤、动物细胞培养条件的理解。解答此题，可根据不同培养阶段YE作用的不同特点选择提高抗体A的总产量的策略。

（1）体外培养动物细胞的基本培养液（BM）中除抗生素和一般营养物质外，一般加入动物血清，以满足细胞生命活动的需要。将重组载体导入动物细胞，一般选用显微注射法。

（2）①图1所示实验不同组实验的自变量是YE的不同浓度，探究的是在长期传代培养阶段不同浓度的YE对重组CHO细胞增殖以及抗体A表达量的影响。根据图2可知，长期传代培养阶段YE浓度为1g/L时细胞数目最多，较低浓度YE促进细胞增殖，较高浓度YE抑制细胞增殖。

②图1所示实验探究了在长期传代培养阶段不同浓度的YE对重组CHO细胞增殖以及抗体A表达量的影响，探究YE对批式培养阶段的影响，可将图示1培养步骤颠倒，应在阶段Ⅰ使用BM进行培养，在阶段Ⅱ添加不同浓度YE的BM。

③长期传代培养阶段YE浓度为1g/L时细胞数目最多，较低浓度YE促进细胞增殖，较高浓度YE抑制细胞增殖，该处理对后续批式培养中的细胞增殖及单个细胞的抗体产量基本无影响；批式培养阶段抗体A的总产量随着 YE 浓度的提高而增加，因此为提高抗体A的总产量，可在传代培养过程中添加低浓度YE，批式培养过程中添加高浓度YE。