Question

【题目】下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图完成下列问题。

（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？_____________，为什么？__________________。

（2）过程②必需的酶是____________酶，过程③必需的酶是____________酶。

（3）在利用A、B获得C的过程中，必须用_________切割A和B，使它们产生__________，再加入____________，才可形成C。

（4）为使过程⑧更易进行，可用____________（药剂）处理D。

Answer 1

【答案】（1）不能 皮肤细胞中的胰岛素基因未表达（或未转录），不能形成胰岛素mRNA

（2）逆转录 解旋 （3）同一种限制性内切酶 相同的黏性末端 DNA连接酶 （4）CaCl2

【解析】

分析题图，图中①表示从胰岛B细胞中获取胰岛素mRNA的过程；②为逆转录过程，A为胰岛素基因；③④⑤表示表示目的基因的扩增过程；⑥表示用限制酶切割运载体形成黏性末端的过程，B为质粒；⑦表示基因表达载体的构建过程，C为重组质粒；⑧表示将目的基因导入受体细胞的过程，D为含有重组质粒的大肠杆菌；⑨表示目的基因随着受体细胞的增殖和扩增；⑩是从培养液中获取胰岛素的过程。

（1）细胞中的基因是选择性表达的，人体的皮肤细胞中的胰岛素基因未表达，不会产生胰岛素mRNA，所以不能利用人的皮肤细胞来完成①过程。

（2）根据以上分析已知，过程②为逆转录过程，该过程需要逆转录酶的催化；过程③为DNA的解旋过程，需要解旋酶的催化。

（3）根据以上分析已知，图中A为胰岛素基因，B为质粒，C为重组质粒；必须用同一种限制酶切割胰岛素基因（目的基因）和质粒，使得它们产生相同的黏性末端，再用DNA连接酶连接才可以形成重组质粒。

（4）过程⑧表示将目的基因导入大肠杆菌的过程中，可以用钙离子处理大肠杆菌，使之成为感受态细胞，便于重组质粒的进入。