题目内容
【题目】将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中,可获得抗棉铃虫的转基因棉,其过程如下图所示(注:农杆菌中Ti质粒上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中)。
(质粒中“Bt”代表“Bt基因”,“KmR”代表“卡那霉素抗性基因”)
(1)过程①需用______________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来,应使用__________培养基。
(2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让___________________进入棉花细胞;除尽农杆菌后,还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养,目的是_______________________。
(3)若过程④仅获得大量的根,则应在培养基中增加________________________以获得芽;部分接种在无激素培养基上的芽也能长根,原因是_________________。
(4)检验转基因棉的抗虫性状,常用方法是________。种植转基因抗虫棉能减少____的使用,以减轻环境污染。
【答案】限制性核酸内切 选择 T-DNA 筛选获得T-DNA片段的植物细胞 细胞分裂素浓度 芽顶端合成的生长素向基部运输,促进根的分化 投放棉铃虫 农药
【解析】
据图分析，①表示构建基因表达载体，②表示将目的基因导入受体细胞（采用农杆菌转化法）；③将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，并脱分化形成愈伤组织；④表示再分化形成芽；⑤表示将芽培养成试管苗。
（1）过程①表示基因表达载体的构建过程，需要同种限制性核酸内切对含有Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切，然后再利用DNA连接酶构建重组质粒；筛选含重组质粒的农杆菌应该使用选择培养基。
（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养的目的是让T-DNA进入棉花细胞；卡那霉素的作用是筛选获得T-DNA片段的植物细胞。
（3）过程④中，在培养基中增加细胞分裂素浓度可以获得大量的芽；同时芽顶端合成的生长素向基部运输，也能促进根的分化。
（4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是投放棉铃虫，若棉铃虫大量死亡，说明转基因成功。种植转基因抗虫棉能减少农药的使用，以减轻环境污染。
