题目内容
【题目】某研究者分别给3只同种小鼠(X、Y和Z)接种抗原(A)引发免疫反应,每只小鼠接种5次,每次接种一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如图所示.
若要制备杂交瘤细胞,需取发生免疫反应后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞.
回答下列问题:
(1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过__次免疫后才能符合要求.达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的小鼠是__,理由是__.
(2)杂交瘤细胞中有__个细胞核,染色体数目最多时为__条.
(3)由杂交瘤细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有__、__的特点.
(4)与植物细胞、微生物细胞相比,体外培养杂交瘤细胞对环境条件的要求比较高.培养液中除了含无机盐、葡萄糖、氨基酸等营养成分,还需添加__.此外,需保证适宜的__、稳定的pH和渗透压,培养液中的__水平会直接影响细胞的生长和代谢.
【答案】四 Y Y小鼠的抗体效价最高 1 200 特异性强 纯度高 动物血清 温度 溶解氧
【解析】
用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价,由图可知,随着免疫次数的增加,血清抗体效价逐渐升高。在第四次免疫过程中出现了Y血清抗体均达到16000以上;在第五次免疫中,Y的效价最大,最适合用于制备B淋巴细胞;B细胞与骨髓瘤细胞形成的杂交细胞有三种:B淋巴细胞自身融合的细胞,骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞。融合形成的杂交瘤细胞,具有2个亲本的染色体,故染色体为100条。
(1)据图分析,第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上,小鼠Y的B淋巴细胞产生抗体效价最高,最适用于制备单克隆抗体。
(2)杂交瘤细胞形成后,由于核膜具有流动性,故小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨骼瘤细胞核会融合形成一个杂交的细胞核。小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)和骨髓瘤细胞(染色体数目60条)融合后,染色体可达100条,在有丝分裂后期染色体数目临时加倍为200条。
(3)由杂交瘤细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有特异性强、纯度高的特点。
(4)动物细胞的体外培养对环境条件有比较高的要求,如无菌、无毒的环境;营养物质要充沛,还需加入血清、血浆等天然物质;同时需要适宜的温度和PH;95%空气和5%CO2气体环境等。