Question

【题目】人乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白，主要由乳腺上皮细胞表达和分泌。它不仅参与铁的转运，而且具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能，被认为是一种新型抗菌、抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂。下图表示用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，请据图回答：

（1）在构建重组质粒时，为防止目的基因和运载体自身环化，应先用_____限制性核酸内切酶处理人乳铁蛋白基因和运载体，然后用 ___________ 酶处理得到重组质粒。

（2）在进行①操作过程中，为了获得更多的卵子，应对良种母奶牛进行_____处理，从公牛中获得的精子需要经过________________ 培养才能与卵细胞结合。

（3）过程③常用________________方法将重组质粒导入到受精卵中。图中采用的生物工程技术④和⑥分别是 _____和 _____，后者在操作前通常取囊胚期的_____细胞进行性别鉴定。

（4）对代孕母牛要进行_____处理，使之与供体的生理状况保持相同，转基因奶牛成功的标志是_____。

Answer 1

【答案】SmaⅠ和PstⅠ DNA连接酶 超数排卵 获能 显微注射法 （早期）胚胎体外培养 胚胎移植 滋养层细胞 同期发情处理 转基因母牛的乳汁中含有人乳铁蛋白

【解析】

题图表示用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，包括了基因工程技术、体外受精技术、早期胚胎培养及胚胎移植技术，其中①表示卵母细胞的采集与培养，②表示精子的获取与获能，③表示将目的基因导入受体细胞，④早期胚胎培养，⑤早期胚胎（囊胚或桑葚胚），⑥指胚胎移植。

（1）在构建重组质粒时，为防止目的基因和运载体自身环化，应使目的基因两端露出的黏性末端不同，AluⅠ在目的基因里面，会破坏目的基因，故应选用SmaⅠ和PstⅠ限制性核酸内切酶处理人乳铁蛋白基因和运载体，然后用DNA连接酶处理得到重组质粒。

（2）为了获得更多的卵子，应对良种母奶牛进行促性腺激素处理，使其超数排卵，从公牛中获得的精子需要经过获能培养才能与卵细胞结合。

（3）将重组质粒导入到受精卵中常用的方法是显微注射法。图中采用的生物工程技术④是早期胚胎培养，⑥是胚胎移植，胚胎移植前通常取囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定。

（4）为使代孕母牛与供体的生理状况保持相同，应对代孕母牛进行同期发情处理，转基因奶牛成功的标志是转基因母牛的乳汁中含有人乳铁蛋白。