题目内容
【题目】某些微生物能表达黄曲霉毒素B1（AFB1）解毒酶．将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图。
据图回答问题：
(1)过程I需要选择含解毒酶的菌液中的细胞提取总RNA，理由是____________。
(2)过程Ⅱ中，需要用引物的原因是____________________________。
(3)构建酵母工程菌最常用的运载工具是____________，操作程序中关键环节是________，检测酵母工程菌中AFB1解毒酶基因是否转录，应采用____________方法。
(4)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高酶的活性出发，设计预期的____________，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的________________。
【答案】 菌液中含解毒酶，意味着细胞中解毒酶基因的正常（完成了）表达 DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3’端延伸DNA链 质粒 构建基因表达载体 分子杂交 蛋白质结构 脱氧核苷酸序列
【解析】试题分析：图示为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图，先用反转录法获得目的基因，再利用PCR技术扩增目的基因，进而导入酵母菌、表达纯化获得AFB1解毒酶。
（1）由于菌液中含解毒酶，意味着细胞中解毒酶基因的正常（完成了）表达，所以过程l应选择甲菌液的细胞提取总RNA。
（2）由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3’端延伸DNA链，因此过程Ⅱ中，需要用引物。
（3）构建酵母工程菌时，常用的运载体是质粒，关键步骤是构建基因表达载体；转录的产物是mRNA，可以利用分子杂交法进行检测。
（4）蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成，所以设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列，从而提高酶的活性。
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