题目内容

【题目】铁皮石斛是我国名贵中药,生物碱是其有效成分之一。应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎(简称PLBs,类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如下:

在固体培养基上,PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示,请回答下列问题:

(1)选用新生营养芽为外植体的原因是____________________,诱导外植体形成PLBs的过程称________。

(2)与黑暗条件下相比,PLBs在光照条件下生长的优势体现在______________,______________,________________。

(3)脱落酸(ABA)能提高生物碱含量,但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养,推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测,在设计实验方案时探讨了以下问题:

①ABA的浓度梯度设置和添加方式:设4个ABA处理组,1个空白对照组,3次重复。因ABA受热易分解,故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基______后按比例加入。

②实验进程和取样:实验50天完成,每10天取样,将样品(PLBs)称重(g/瓶)后再测定生物碱含量。如初始(第0天)数据已知,实验过程中还需测定的样品数为________。

③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间:当某3个样品(重复样)的__________________________时,其对应的ABA浓度为适宜浓度,对应的培养时间是适应培养时间。

【答案】

(1)细胞分化程度低,容易诱导形成PLBs 细胞的脱分化

(2)生长起始较快 快速生长时间较长 PLBs产量较高

(3)①灭菌、冷却

②75

③PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大

【解析】

(1)新生营养芽分裂能力强,细胞分化程度低,容易诱导形成PLBs;根据题干可知PLBs类似愈伤组织,外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。

(2)据图分析,光照下PLBs的重量高于黑暗条件下,PLBs在光照条件下生长的优势体现生长起始较快,快速生长时间较长,PLBs产量较高。

(3)①由于ABA受热易分解,所以各种液体培养基灭菌并冷却后才能按比例加入一定浓度的无菌ABA母液。

②分析图解可知,4个ABA处理组,1个空白对照组,共5组,50天每10天取样,需要取样5次,3次重复,即5×5×3=75。故实验过程中还需测定的样品数为75。

③PLBs(类似愈伤组织)重量与生物碱含量呈正相关,故当某3个样品(重复样)的PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时,其对应的ABA浓度为适宜浓度,对应的培养时间是适宜培养时间。

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