题目内容
【题目】利用某高致病性病毒特异性的VP40抗原蛋白来制备单克隆抗体的流程图如下，请回答：
（1）过程①利用质粒构建表达载体，质粒的来源主要是___________，质粒能够在受体细胞中________，是其作为运载体的原因之一。
（2）过程②用Ca2+处理大肠杆菌，使其处于___________。在培养基中加入四环素，能获得含有目的基因的受体菌，原因是___________。可以利用___________检测VP40基因是否进入大肠杆菌。
（3）用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是___________；对杂交瘤细胞还需进行___________培养和抗体检测，最终获得单克隆抗体。
【答案】 细菌、酵母菌等 自我复制和稳定存在 感受态 质粒上有四环素抗性基因（或“受体菌获得抗四环素的特性”） VP40基因探针 （或DNA分子杂交技术） 在体外培养条件下能无限增殖且能产生单一成分的抗体 克隆化
【解析】据图分析，①表示构建基因表达载体的过程，②表示将目的基因导入受体细胞（大肠杆菌）的过程，③表示目的基因在受体细胞中的表达过程，④表示诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程。
（1）质粒是基因工程中常用的运载体，主要来源于细菌、酵母菌等，其作为运载体的原因之一是能够在受体细胞中自我复制和稳定存在。
（2）过程②表示将目的基因导入受体细胞（大肠杆菌）的过程，一般需要用钙离子处理，使得大肠杆菌处于感受态，以便目的基因的导入。由于质粒上有四环素抗性基因，所以在培养基中加入四环素，能获得含有目的基因的受体菌；检测目的基因（VP40基因）是否进入大肠杆菌可以用DNA分子杂交技术（VP40基因探针）。
（3）杂交瘤细胞是由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成的，具有两个细胞的遗传特性，因此其在体外培养条件下能无限增殖且能产生单一成分的抗体；对杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，最终获得单克隆抗体。
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