题目内容
【题目】将苏云金芽孢杆菌Bt毒蛋白基因导入棉花细胞中，可获得转基因抗虫棉，其过程如图所示：
（1）过程①所需要的酶是____________，卡那霉素抗性基因的作用是_______________________。
（2）过程③将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让重组Ti质粒上的__________________转移进入棉花细胞，并整合到棉花细胞的___________上。
（3）若要检测转基因棉花细胞中Bt毒蛋白基因是否转录出了mRNA,采用________________________技术，用_______________做探针；若要鉴定转基因棉花是否被赋予抗虫特性，需要做____________实验。
（4）种植转基因抗虫棉可以大大减少_____________的使用，以减轻环境污染。
【答案】限制酶和DNA连接酶 作为标记基因，检测目的基因是否导入受体细胞（供重组DNA的鉴定和选择） T-DNA 染色体DNA 分子杂交 标记的Bt毒蛋白（目的）基因 抗虫接种 农药（杀虫剂）
【解析】
分析题图：图示为转基因抗虫棉的培育过程图，主要包括：①基因表达载体的构建；②将目的基因导入受体细胞（采用农杆菌转化法）；③将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，并脱分化形成愈伤组织，④⑤再分化、发育，将离体棉花植株培育成抗虫棉还需采用植物组织培养技术。
（1）过程①为基因表达载体的构建，需要同种限制酶对含有Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切和连接，故需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶。卡那霉素抗性基因作为标记基因，其作用是检测目的基因是否导入受体细胞，供重组DNA的鉴定和选择。
（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养的目的是让T-DNA进入棉花细胞，并整合到棉花细胞的染色体DNA上。
（3）若要检测转基因棉花细胞中Bt毒蛋白基因是否转录出了mRNA，应采用核酸分子杂交技术，用标记的Bt毒蛋白（目的）基因做探针；检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是投放棉铃虫，做抗虫接种实验，若棉铃虫大量死亡，说明转基因成功。
（4）种植转基因抗虫棉能减少农药的使用，以减轻环境污染。
【题目】下图是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒PO具有四环素抗性基因 ( telr)和氨苄青霉索抗性基因(ampr)。请回答下列问题：
(1)基因工程中所用的目的基因可以从自然界中已有的物种中分离出来，也可以 _________。利用PCR技术扩增目的基因片段时，常使用的酶是____ 。
(2)重组载体构建的过程中所需的酶有 ____和 ____。
(3)为进一步鉴定菌体是否含有重组质粒P3，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如下表（“+”代表生长，“-”代表不生长）。
菌落类型 平板类型 | A | B | C |
无抗生素 | + | + | + |
氨苄青霉素 | + | - | + |
四环素 | + | - | - |
氨苄青霉素+四环素 | + | - | - |
根据表中结果判断，A、B、C菌落质粒导入情况分别是____、____、____。
(4)将目的基因导入动物细胞的常用方法是____。
