题目内容
【题目】如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图回答下列问题：
（1）过程②④需要的酶分别是___________、___________。
（2）该项技术定向改变了大肠杆菌的性状，这在可遗传变异的来源中属于____________________。
（3）图中B的基本组成单位有__________种；基因工程的核心步骤是_________(填图中序号)。
（4）为便于重组DNA的选择和鉴定，图中C的组成必须有_________；为使过程⑧更易进行，可用_______处理大肠杆菌。
（5）若过程⑨发生了变异，则此变异为___________________。
（6）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程?_______(“能”或者“否”)为什么?___________
【答案】逆转录酶 Taq酶 基因重组 4 ⑥和⑦（或者⑦） 标记基因 Ca2+（或者CaCl2溶液） 基因突变 否 皮肤细胞中的胰岛素基因没有表达，不能形成相应的mRNA
【解析】
据图①为提取分离得到胰岛素mRNA的过程，②为逆转录合成胰岛素目的基因，③为转录，④为PCR技术大量扩增目的基因，⑤为重复进行上述操作，⑥为限制酶切割运载体质粒，⑦为将目的基因和运载体连接在一起，形成基因表达载体，⑧将目的基因导入受体细胞，⑨为工程菌的大量培养繁殖，⑩为分离得到目的基因产物人的胰岛素；图中A为胰岛素目的基因，B为运载体质粒，C为基因表达载体，D为导入目的基因的大肠杆菌。
（1）②为逆转录合成胰岛素目的基因，mRNA的逆转录需要逆转录酶；④为PCR技术大量扩增目的基因，在较高温度下进行DNA的复制需要耐高温的Taq酶。
（2）该项技术定向改变了大肠杆菌的性状，是基因工程的过程，人为的基因工程属于基因重组的一种。
（3）图中B为运载体质粒，成分是环状的DNA，组成单位为4种脱氧核苷酸；基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，包括⑥剪切和⑦拼接两个过程。
（4）图中C为基因表达载体（重组质粒），为了便于重组DNA的鉴定和选择，其上必须有标记基因；⑧为将目的基因导入受体细胞大肠杆菌，常用Ca2+（CaCl2）处理法。
（5）⑨为工程菌的大量培养繁殖，得到使外源基因高效率表达的菌类细胞株系称为工程菌，由于大肠杆菌是原核生物，无染色体变异和基因重组，若过程⑨发生了变异即为基因突变。
（6）胰岛素基因在人的皮肤细胞中不进行转录，无法得到其mRNA，不能利用人的皮肤细胞来完成①提取mRNA的过程。
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