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【题目】DNA分子模板链上的碱基序列携带的遗传信息最终翻译的氨基酸如表,则图所示的tRNA所携带的氨基酸是(

GAG

GCC

CTC

TGC

亮氨酸

丙氨酸

谷氨酸

苏氨酸

A.亮氨酸B.丙氨酸C.谷氨酸D.苏氨酸

【答案】A

【解析】

遗传信息在DNA上,转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程,这样遗传信息就从DNA转移到mRNA上;mRNA上控制一个氨基酸的3个相邻的碱基称为一个密码子,tRNA一端的三个碱基称为反密码子,与密码子互补配对。

tRNA上的三个碱基(GAG)属于反密码子,与密码子互补配对,因此图中mRNA对应的密码子为CUC,而密码子在mRNA上,mRNADNA上的模板链转录而来的,因此DNA模板链上的碱基序列是GAG,结合表中信息可知该tRNA所携带的氨基酸是亮氨酸,故选A

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【题目】乳糖酶是一种生物酶制剂,主要用来治疗乳糖不耐受症。研究人员利用基因工程技术,将人工优化的米曲霉乳糖酶基因(lacA)导入乳酸克鲁维酵母细胞,获得了高效表达乳糖酶的重组菌株。下图1为载体PKLACl的限制酶切图谱(总长度为9091bpbp表示碱基对;XhoⅠ、BglⅡ、SacⅡ表示限制酶,数字代表碱基的编号),amdS基因编码的乙酰胺酶能够将乙酰胺降解成氨,只有转化成功的乳酸克鲁维酵母才能在乙酰胺作为唯一氮源的培养基中生长。图2为含有lacADNA片段。

请回答下列问题:

1)米曲霉合成并分泌至胞外的乳糖酶能将乳糖分解为________

2)优化后的米曲霉乳糖酶基因片段lacAG-C碱基含量由原来的51.4%降低到39.2%,使乳酸克鲁维酵母偏爱的密码子出现的频率大幅度增加,从而在不改变乳糖酶________序列的前提下,提高了重组菌株该基因表达中________(填具体步骤)的效率。

3)将优化的米曲霉乳糖酶基因片段lacApKLACl分别使用用XhoⅠ、BelⅡ双酶切,然后用________连接,得到含目的基因的重组质粒(pKLAC1lacA,长度为12040bp)。若目的基因置换了pKLACl中一段长33bp的片段,则目的基因的长度为________bp.

4)用小剂量质粒提取试剂盒提取重组质粒,对所提取的重组质粒用SacⅡ单酶切后纯化,纯化产物用1%琼脂凝胶进行电泳检测。若结果如图3中的第________(填序号)泳道所示,则说明优化后的目的基因片段lacA成功构建在质粒pKLACl中。

5)将重组质粒pKLACl-lacASacⅡ单酶切使其线性化,纯化后与感受态乳酸克鲁维酵母细胞混合、转化。用________适当稀释细胞液,均匀地涂布于________平板上进行培养,富集并筛选重组菌株。将筛选出的重组菌株进行发酵培养120h,检测________,最终获得高效表达乳糖酶的重组菌株。

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