Question

【题目】P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变．科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用，请回答下列问题：
（1）切下新鲜的肝癌组织，在37℃下用消化30﹣40分钟，在5%培养箱中培养，培养基是模拟了人体的成分配制的，在培养基中加入一定量的抗生素，其目的是 ．
（2）获取P53基因的方法通常包括和 ．
（3）将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合，将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀．最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞．脂质体在这个操作中的作用是 ．
（4）为证明P53基因有抑癌作用，需将两种细胞接入多孔板中，并从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制成如图所示的生长曲线．请分析两条曲线分别是哪种细胞，曲线1是细胞，曲线2是细胞．

Answer 1

【答案】
（1）胰蛋白酶；CO2；内环境；防止杂菌污染
（2）化学方法合成；从基因文库中获取
（3）将P53（目的）基因导入肝癌细胞
（4）肝癌细胞；转入P53基因的肝癌细胞
【解析】解：（1.）动物细胞培养前需要用胰蛋白酶处理组织，使细胞分散成单个细胞．动物细胞培养的条件：①无菌、无毒的环境：消毒、灭菌；添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以清除代谢废物．②营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．③温度和PH．④一定的气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）．
（2.）获取目的基因（P53基因）的方法通常包括化学方法合成和从基因文库中获取．
（3.）脂质体在这个操作中的作用是将P53（目的）基因导入肝癌细胞．
（4.）P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，所导入P53基因的肝癌细胞数目下降，而普通肝癌细胞能无限增殖，其数目不断上升，即曲线1是肝癌细胞，曲线2是转入P53基因的肝癌细胞．
【考点精析】通过灵活运用基因工程的原理及技术和动物细胞与组织培养过程，掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术；取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养即可以解答此题．