Question

【题目】采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法错误的是

①将毒素蛋白注射到棉受精卵中；②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中；③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养；④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵

A. ①②B. ②③C. ③④D. ①④

Answer 1

【答案】A

【解析】

基因工程技术的基本步骤：
(1)目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

(2)基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

(3)将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

(4)目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

①项，将毒素蛋白直接注射到棉受精卵中，受体细胞未获得目的基因，故错误。

②项，将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中，DNA序列无法整合到棉花细胞的染色体上随之复制，可能会被酶水解，故错误。

③项，将目的基因与质粒重组后导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养，细菌实际上起到了转导的作用，故正确。

④项，将目的基因与质粒重组后注射到棉的子房并进入受精卵，这应用了花粉管通道法，故正确。

综上所述，做法错误的是①②，所以，本题正确答案为A。