Question

【题目】如今人类已跨入了蛋白质时代，对蛋白质的研究和应用，首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题：

(1)蛋白质的提取和分离一般分为四步：______、_____、______和纯度鉴定。

(2)如果要从红细胞中分离出血红蛋白，实验前取新鲜血液要在采血容器中预先加入柠檬酸钠，这样做的目的是_______。

(3)装填凝胶色谱柱时，要注意色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡必须重新装。这是因为气泡会搅乱洗脱液中________，降低分离效果。

(4)如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请据图回答下列问题：

①甲装置用于_________，目的是________。用乙装置分离蛋白质的方法叫___________，是根据_______________________分离蛋白质的有效方法。

②用乙装置分离血红蛋白时，待______________________接近色谱柱的底端时，用试管收集流出液，每5 mL收集一管，连续收集。

Answer 1

【答案】样品处理 粗分离 纯化 防止血液凝固 蛋白质的洗脱次序 透析(粗分离) 去除样品中相对分子质量较小的杂质 凝胶色谱法 相对分子质量的大小 红色的蛋白质接近色谱柱的底端

【解析】

（1）蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

步骤	操作
样品处理	通过红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液等操作收集到血红蛋白溶液
粗分离	通过透析法去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小的杂质
纯化	通过凝胶色谱法分离相对分子质量不同的蛋白质
纯度鉴定	经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对纯化后的蛋白质进行纯度鉴定

（2）甲是透析装置，乙是利用凝胶色谱法分离蛋白质的装置。

(1) 蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。

(2) 柠檬酸钠是一种抗凝剂，在新鲜血液中加入柠檬酸钠，可以防止血液凝固。

(3) 装填凝胶色谱柱时，若产生气泡，则气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，从而降低分离效果。

(4) ①甲是透析装置，用于透析，其目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质，使大分子蛋白质保留在袋中。乙是利用凝胶色谱法分离蛋白质的装置，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。

②由于血红蛋白带有红色，当红色的蛋白质接近色谱柱的底端时，用试管收集血红蛋白，每5 mL收集一管，连续收集。