摘要:由于质粒与目的基因具有相同的粘性末端.结合过程中不可能出现下列 哪种情况:( ) A.形成环状的外源DNA B.可能形成环状的载体DNA C.可能形成重组DNA D.只出现重组DNA

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(10分)mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子,具有自我复制、转录和控制合成蛋白质的功能。mtDNA的类型具有明显的种族特异性。现用两种限制性核酸内切酶M和N切割某人的mtDNA(限制酶M和N的识别序列和切割位点如图1所示),然后通过凝胶电泳分离DNA片段(通电状态下,不同分子量的DNA片段在琼脂中的移动距离不同从而被分离),分析后得到下表。

凝胶电泳结果(1kb=1000对碱基)

(数字表示该片段的存在以及数量)

分子量(kb)

酶M

酶N

酶M+酶N

1.0

1

 

1

2.0

 

 

1

 3.0

 

 

1

4.0

 

 

1

5.0

1

 

 

6.0

 

 

1

7.0

 

1

 

9.0

 

1

 

10.0

1

 

 

(1)该mtDNA的长度为___________kb。在该DNA分子中,M酶与N酶的切割位点分别有____________个。

(2)M酶与N酶切出的能相互粘连的末端能在______________酶的作用下相互连接,请将连接的结果表示出来:_______________________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割,请简述理由:________________________________________。

(3)图2为真核细胞的某基因的结构图以及限制酶M和N的切割位点。现用酶切法直接从供体细胞中切割图2中的基因从而获得目的基因,可选用酶______来切割。这个方法虽然操作方便,但切割下的基因中含有不能指导蛋白质合成的区域。因此,目前往往采用逆转录的人工合成的方法,其基本步骤是:__________________。

图2

(4)已知图2中Ⅱ区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G 和C的总数共有400个,则由该区转录的mRNA中A和U总数是_____________。

 

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Ⅰ.市场上有一种宠物猪,其背部皮毛颜色由一组复等位基因A1、A2和A3控制,且A1、A2和A3之间共显性(即A1、A2和A3任何两个组合在一起,基因均可表达),下图表示各基因与控制酶之间的关系。据此回答以下问题:

(1)上图体现基因控制生物性状的途径之一是                                  

(2)该宠物猪种群中关于体色共有          种基因型、纯合子有               种。

(3)分析图可知,该宠物猪种群中体色为           的个体一定为纯合子。

(4)现有一头白色公猪,如要确定其基因型可选择多头          色异性个体与之交配(假设后代数量符合统计要求)。预测结果及相应结论:

                                                                       

                                                                       

                                                                      

Ⅱ.科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白(且具有抗菌能力)。这种蛋白质具有极强的抗菌能力,受到研究者重视。若临床使用发现此蛋白质对肿瘤确良好的疗效,可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程大体如下:

(1)在基因工程中,获取目的基因的方法有                        (至少写出两种)。

(2)酶切此家蝇DNA分子和酶切质粒时,所用的限制酶可以不同,但是产生的粘性末端要满足                条件。

(3)将抗肿瘤基因导入大肠杆菌,并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白,由于                ,因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白。

(4)细胞工程也可以将抗肿瘤蛋白临床使用,下面是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是    细胞,要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过           次筛选。从小鼠体内提取分离该细胞之前,给小鼠注射的特定的物质是    

②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的    、聚乙二醇或电激等诱导。

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Ⅰ.(15分)市场上有一种宠物猪,其背部皮毛颜色由一组复等位基因A1、A2和A3控制,且A1、A2和A3之间共显性(即A1、A2和A3任何两个组合在一起,基因均可表达),下图表示各基因与控制酶之间的关系。据此回答以下问题:

(1)上图体现基因控制生物性状的途径之一是                                  
(2)该宠物猪种群中关于体色共有         种基因型、纯合子有              种。
(3)分析图可知,该宠物猪种群中体色为          的个体一定为纯合子。
(4)现有一头白色公猪,如要确定其基因型可选择多头         色异性个体与之交配(假设后代数量符合统计要求)。预测结果及相应结论:
                                                                      
                                                                      
                                                                      
Ⅱ.(9分)科学家发现家蝇体内存在一种抗肿瘤蛋白(且具有抗菌能力)。这种蛋白质具有极强的抗菌能力,受到研究者重视。若临床使用发现此蛋白质对肿瘤确良好的疗效,可以通过基因工程技术导入大肠杆菌内进行大量生产。其过程大体如下:

(1)在基因工程中,获取目的基因的方法有                       (至少写出两种)。
(2)酶切此家蝇DNA分子和酶切质粒时,所用的限制酶可以不同,但是产生的粘性末端要满足               条件。
(3)将抗肿瘤基因导入大肠杆菌,并在大肠杆菌细胞内成功表达产生了抗肿瘤蛋白,由于               ,因此在短时间内就能获得大量的抗肿瘤蛋白。
(4)细胞工程也可以将抗肿瘤蛋白临床使用,下面是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是    细胞,要获得能产生抗肿瘤蛋白抗体的杂交瘤细胞至少要经过          次筛选。从小鼠体内提取分离该细胞之前,给小鼠注射的特定的物质是    
②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的    、聚乙二醇或电激等诱导。

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