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(22分,每空2分)I.多数真核生物基因中编码蛋白质的序列被一些不编码蛋白质的序列隔开,每一个不编码蛋白质的序列称为一个内含子。这类基因经转录、加工形成的mRNA中只含有编码蛋白质的序列。某同学为检测某基因中是否存在内含子,进行了下面的实验:
步骤①:获取该基因的双链DNA片段及其mRNA;
步骤②:加热DNA双链使之成为单链,并与步骤①所获得的mRNA按照碱基配对原则形成双链分子;
步骤③:制片、染色、电镜观察,可观察到图中结果。
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请回答:
(1) 图中凸环形成的原因是____________________,说明该基因有 个内含子。
(2) 若蓝藻基因编码区与该生物基因编码区长度一样,则其编码的氨基酸的数目比该生物基因编码的氨基酸的数目______ 。(少,相等,多)
II. 番茄果实成熟过程中,某种酶(PG)开始合成并显著增加,促使果实变红变软。但不利于长途运输和长期保鲜。科学家利用反义RNA技术(见图解),可有效解决此问题。该技术的核心是,从番茄体细胞中获得指导PG合成的信使RNA,继而以该信使RNA为模板人工合成反义基因并将之导入离体番茄体细胞,经组织培养获得完整植株。新植株在果实发育过程中,反义基因经转录产生的反义RNA与细胞原有mRNA(靶mRNA)互补形成双链RNA,阻止靶mRNA进一步翻译形成PG,从而达到抑制果实成熟的目的。请结合图解回答:
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(1) 反义基因像一般基因一样是一段双链的DNA分子,合成该分子的第一条链时,使用的模板是细胞质中的信使RNA,原料是四种______________,所用的酶是______________。
(2) 开始合成的反义基因第一条链是与模板RNA连在一起的杂交双链,通过加热去除RNA,然后再以反义基因第一条链为模板合成第二条链,这样一个完整的反义基因被合成。若要以完整双链反义基因克隆成百上千的反义基因,所用复制方式为__________________。
(3) 将人工合成的反义基因导入番茄叶肉细胞的运输工具是________________,该目的基因与运输工具相结合需要使用的酶有___________________________________,。假如反义基因最终的导入位置是在受体细胞的细胞质中,要想通过杂交使得这个基因传下去,则应在杂交中选择转基因植物做_____________________(选“母本”或“父本”)
(4) 离体番茄体细胞,组织培养获得完整植株。其培养基成分与动物细胞培养液相比较特有的成分是_____________ 。
20世纪90年代由美国科学家首先提出了“人类基因组计划”,也积极开展了其他生物基因组的研究。按照此计划,需要测定的马的单倍体基因组为_____________条染色体(马为二倍体,其染色体条数为64)。
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回答有关生物工程的问题。(8分)
小鼠是实验室常用的实验动物,如:利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现。
用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体。
(1).将小鼠等分为两组,甲组定期间隔注射适量的含X病毒的溶液,其目的是____________________;乙组注射________________(作对照)。
(2).为了保存有价值的杂交瘤细胞系,通常用超低温将其冻存,请分析其原因____________
___________________。
用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术,能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下:
第一步:分离小鼠胚胎干细胞,这些细胞中含有需要改造的基因,称“靶基因”。
第二步:获取与“靶基因”同源的DNA片断,利用特定技术在该DNA片段上插入neoR基因(新霉素抗性基因)成为突变DNA(如下图),使该片段上的靶基因失活。
第三步:将插入neoR基因(新霉素抗性基因)的靶基因转移入胚胎干细胞,再通过同源互换,用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个,完成对胚胎干细胞的基因改造。
第四步:将第三步处理后的胚胎干细胞,转移到特定培养基中筛选培养。
其基本原理如下图所示:![]()
(3).第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是 。neoR基因不仅能使靶基因失活,还可作为 ;“靶基因失活”的根本原因是 。
(4).从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞,到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠,运用到的生物技术有 、 等。
回答有关生物工程的问题。(8分)
小鼠是实验室常用的实验动物,如:利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现。
用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体。
(1).将小鼠等分为两组,甲组定期间隔注射适量的含X病毒的溶液,其目的是____________________;乙组注射________________(作对照)。
(2).为了保存有价值的杂交瘤细胞系,通常用超低温将其冻存,请分析其原因____________
___________________。
用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术,能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下:
第一步:分离小鼠胚胎干细胞,这些细胞中含有需要改造的基因,称“靶基因”。
第二步:获取与“靶基因”同源的DNA片断,利用特定技术在该DNA片段上插入neoR基因(新霉素抗性基因)成为突变DNA(如下图),使该片段上的靶基因失活。
第三步:将插入neoR基因(新霉素抗性基因)的靶基因转移入胚胎干细胞,再通过同源互换,用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个,完成对胚胎干细胞的基因改造。
第四步:将第三步处理后的胚胎干细胞,转移到特定培养基中筛选培养。
其基本原理如下图所示:
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(3).第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是 。neoR基因不仅能使靶基因失活,还可作为 ;“靶基因失活”的根本原因是 。
(4).从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞,到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠,运用到的生物技术有 、 等。
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回答有关生物工程的问题。
小鼠是实验室常用的实验动物,如:利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现。
用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体。
(1)将小鼠等分为两组,甲组定期间隔注射适量的含X病毒的溶液,其目的是________;乙组注射________(作对照)。
(2)为了保存有价值的杂交瘤细胞系,通常用超低温将其冻存,请分析其原因________。
用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术,能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下:
第一步:分离小鼠胚胎干细胞,这些细胞中含有需要改造的基因,称“靶基因”。
第二步:获取与“靶基因”同源的DNA片断,利用特定技术在该DNA片段上插入neoR基因(新霉素抗性基因)成为突变DNA(如下图),使该片段上的靶基因失活。
第三步:将插入neoR基因(新霉素抗性基因)的靶基因转移入胚胎干细胞,再通过同源互换,用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个,完成对胚胎干细胞的基因改造。
第四步:将第三步处理后的胚胎干细胞,转移到特定培养基中筛选培养。
其基本原理下图所示:
(3)第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是________。neoR基因不仅能使靶基因失活,还可作为________;“靶基因失活”的根本原因是________。
(4)从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞,到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠,运用到的生物技术有________、________等。
回答有关生物工程的问题。
小鼠是实验室常用的实验动物,如:利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现。
用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体。
1.将小鼠等分为两组,甲组定期间隔注射适量的含X病毒的溶液,其目的是_________;乙组注射_________。
2.一段时间后,取甲组小鼠脾脏中的相应细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,细胞融合的结构特点是_________。融合形成的杂交瘤细胞特点是_________。
3.为了保存有价值的杂交瘤细胞系,通常用超低温将其冻存,请分析其原_________。
用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术,能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下:
第一步:分离小鼠胚胎干细胞,这些细胞中含有需要改造的基因,称“靶基因”。
第二步:获取与“靶基因”同源的DNA片断,利用特定技术在该DNA片段上插入neoR基因(新霉素抗性基因)成为突变DNA(如下图),使该片段上的靶基因失活。
第三步:将插入neoR基因(新霉素抗性基因)的靶基因转移入胚胎干细胞,再通过同源互换,用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个,完成对胚胎干细胞的基因改造。
第四步:将第三步处理后的胚胎干细胞,转移到特定培养基中筛选培养。
其基本原理如下图所示:
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4.第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是_________。neoR基因不仅能使靶基因失活,还是_________;“靶基因失活”的含义是_________。
5.从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞,到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠,运用到的生物技术有_________、_________等。
6.科学家可以通过“基因敲除”来研究基因的功能,4题中获得的基因敲除小鼠,能否直接用来研究基因功能并说明原因_________。