摘要:培养微生物的实验原理有:①根据 选择多种原料配置培养基.培养基还要有 .常用 培养基培养某些细菌, 培养基培养平菇黑木耳等食用菌.②配置好的培养基必须经过灭菌.灭菌指 .实验室最常用的灭菌法是 .接种环接种针是用 灭菌的.③将某种微生物 在彻底灭菌的培养基上.经过一段时间的 后.就能够得到生长良好的 .

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(12分)微生物的抗性突变是自发产生的?还是与相应的环境因素有关?有人设计下列实验,以研究探讨该问题。实验选用对链霉素敏感的大肠杆菌K12。培养基3、7、11中含有链霉素,其它培养基中不含链霉素。请据实验回答:

(1)将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养,接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养。“印章”位置保持不变。培养皿2、3根据其功能,分别称为       培养基、       培养基。“印章”使用前需作          处理。

(2)培养基2中的菌落是          ,培养基3中的菌落是              

(3)培养基3的A点处有菌落生长,将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中。如图反复几次实验。请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”:      ,原因是                                          

(4)培养液4、8中的菌液越来越少,但培养皿7、11中的菌落越来越多。你的解释是:                   

(5)要分离出单个菌落,除了本实验中的涂布法外,还可以用___________法。

(6)上述不含链霉素培养基通常使用的是                ,下表是另一种培养基配方,该培养基具有

          作用。

成分

KH2PO4

Na2 PO4

MgSO4·7H2O

葡萄糖

尿素

琼脂

含量

1.4g

2.1g

0.2g

10.0g

1.0g

15.0g

(7)现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5,它们不能合成生长所必需的物质G,已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物,但不知这些物质合成的顺序,于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响,结果如右表所示。根据以上结果,推测这几种物质的合成顺序应是                   

 

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[选修I:生物技术与实践模块]

    为了研究微生物的抗药性突变是自发产生的还是在环境因素的作用下产生的。科学家利用大肠杆菌设计了一个影印培养实验。实验原理是把长有数百个菌落的细菌母种培养皿,倒置于包有一层灭菌丝绒布的木质圆柱体(直径略小于培养皿平板)上,使其均匀地沾满来自母培养皿平板上的菌落,然后通过这一“印章”把母板上的菌落“忠实地”—接种到不同的其它培养基上。

    下图就是利用影印培养技术证明大肠杆菌产生抗链霉素突变的实验。

具体做法是:

    第一步:首先把大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不合链霉素的平板a的表面,待其长出密集的小茵落后,用影印法接种到不含链霉素的培养基平板b上,随即再影印到含有链霉素的培养基平板c上。经培养后,在平板c上出现了个别抗链霉素的菌落。

    第二步:对培养皿b和c进行比较,在平板b上找到与平板c上那几个抗性菌落的“孪生兄弟”。   

    第三步:把平板b上与平板c上菌落相对应的一个部位L的菌落挑至不合链霉素的培养液d中,经培养后,再涂布在平板e上。

重复以上各步骤,最后在试管l中获得了较纯的抗性菌落。

根据以上材料回答下列问题:

(1)大肠杆菌的同化作用类型为____,与酵母菌相比,大肠杆菌细胞在结构上的主要特点是.

(2)从培养基的功能上看,含有链霉素的培养基属于——培养基。若在培养皿的培养基中加入伊红和美蓝,则培养皿中长出的菌落颜色表现为___________ 。

    (3)大肠杆菌抗链霉素基因存在于细胞的_________结构上,在基因工程中,该结构常被用作运载体。

(4)c、g、k培养基中加入链霉素的作用是___________,C培养皿中的菌落比a、b中的菌落少很多,说明了___________________________。

(5)该实验最关键的设计思路是________________________________________________

(6)你认为该实验能得到的结论是______________________________________________

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果酒、面包制作等都需要酵母菌,酵母菌可以用液体培养基(培养液)来培养,培养液中酵母菌种群的增长情况与发酵食品的制作有密切关系。
(1)土壤是酵母菌的大本营,若从自然界分离得到的样品中含有谷氨酸棒状杆菌、硝化细菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌等,现欲筛选出酵母菌,则简便的方案是____。
(2)某生物兴趣小组的同学在不同的条件下,观察酵母菌种群的生长情况。下表中的数据是在有氧情况下培养测得的酵母菌数(×106个/mL)。请根据所学的知识,回答下列有关问题:
实验研究的条件如下:
A:培养液10mL,加入干酵母液0.1mL,环境温度28℃。
B:无菌水10mL,加入干酵母液0.1mL,环境温度28℃。
①.请写出该实验的课题名称:_________________。
②.本实验过程中,每隔24小时取一定量的酵母菌培养液,用血球计数板在显微镜下进行细胞计数,并以多次计数的平均值估算试管中酵母菌的种群密度,这种方法称为________。每次取样前都应振荡试管,目的是使________。如果视野太暗导致看不清晰,应当采取的措施是___________。
③.A组测定的数据中,培养一天和培养六天的酵母菌数均为0.8×l06个/mL,你认为其生长情况相同吗?________,理由是________________。
(3)目前,我国已经利用酵母菌实现了乙肝疫苗、干扰素的商业化生产。在这些技术中使用的工具酶是______。在实际应用中发现,用真菌(酵母菌)生产的基因工程药物(如干扰素)要比用细菌生产的功效好。请从这两类生物细胞结构的相关差异说明原因:__________________。
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