摘要:常用的去细胞壁的方法是 法.在温和条件下用 . 等分解植物细胞的细胞壁.

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下图为种间植物细胞融合再生植物示意图,请据图回答:

(1)步骤①利用              酶和                   酶去除细胞壁
(2)步骤②表示                           ,常用的化学试剂是               试剂。物理方法有                                 (至少写出2种)。
(3)植物细胞融合成功的标志是_____________________。
(4)植物组织细胞具有                    ,因此,可以利用组织培养技术将植物组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中的                                   。在④⑤培养过程中,培养基需要添加                                等植物激素,且在操作与培养过程中除保证必要的温度、光照和氧气等外界条件外,还必须保证的关键条件
                    的环境。
(5)若亲本植物A与B都是二倍体,杂种植株为       倍体。从理论上讲,杂种个体的育性为可育。因此,该项研究其突出的优点是________________                          
(6)动物细胞经诱导亦能融合,动物细胞融合技术最重要的用途是                  

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下图为种间植物细胞融合再生植物示意图,请据图回答:

(1)步骤①利用              酶和                   去除细胞壁。

(2)步骤②表示                           ,常用的化学试剂是               试剂。物理方法有                                 (至少写出2种)。

(3)植物细胞融合成功的标志是_____________________。

(4)植物组织细胞具有                    ,因此,可以利用组织培养技术将植物组织细胞培育成植株。图中④、⑤依次表示组织培养过程中的                                   。在④⑤培养过程中,培养基需要添加                                等植物激素,且在操作与培养过程中除保证必要的温度、光照和氧气等外界条件外,还必须保证的关键条件

                    的环境。

(5)若亲本植物A与B都是二倍体,杂种植株为       倍体。从理论上讲,杂种个体的育性为可育。因此,该项研究其突出的优点是________________                          

(6)动物细胞经诱导亦能融合,动物细胞融合技术最重要的用途是                  

 

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(11分)“白菜—甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种,它具有生长期短、耐热性强和易储存等优点。如图是“白菜—甘蓝”培育过程示意图,请完成下列问题:

(1)培育成白菜—甘蓝植株,采用的技术手段是________。该过程应用的原理是______和__________。

(2)要制备“白菜—甘蓝”的人工种子,要在d步骤选取具有生根、发芽能力的________结构,包裹上人工种皮即可。

(3)在d过程培养中,培养基的成分通常包括水、______、有机营养和________等,同时,在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,成功的另一个关键是操作过程中必须保证__________________。

(4)在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是______________.

(5)要获得图中白菜和甘蓝的原生质体,首先需要分别除去白菜和甘蓝细胞的细胞壁。用以下材料和用具:紫色洋葱鳞片叶、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶和果胶酶、蒸馏水、镊子、显微镜、载玻片等,可除去细胞壁。在实验过程中要选取适宜浓度的蔗糖溶液而不用蒸馏水的理由是

_______________________________________________________(2)

(6)采用特异性引物对另两种植物花椰菜和黑芥基因组DNA 进行PCR 扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种及纯种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4 进行PCR 扩增的结果。据图判断,再生植株1—4 中后代性状不分离的是         

 

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现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,研究人员计划通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,并完成下列有关问题。

实验原理:

①有毒物质会使动物细胞发生染色体变异,根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)可判断该化学物质的毒性。

②有毒物质也可以让动物细胞发生癌变,根据癌变细胞的数量也可以判断该化学物质毒性。

材料用具:略

实验步骤:

(1)制备细胞悬浮液。

把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入____________处理,使胚胎组织分散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。

(2)进行细胞培养。

①取A、B、C三个洁净的培养瓶,分别加入等量的细胞悬浮液;

②向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液,C瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀;

③把三个培养瓶放在适宜温度的恒温箱中培养一段时间,此时悬浮液中分散的细胞都贴附在瓶壁上,这种现象称为________,当这些细胞的表面相互接触后就会发生__________________________________现象,细胞将停止生长。

(3)检验。

方法1:

①同时从恒温箱中取出三个培养瓶,用__________将细胞从瓶壁上洗脱下来,加入动物细胞固定液,迅速杀死细胞并固定细胞分裂相。

②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,滴加1~2滴龙胆紫溶液进行染色,3~5 min后,盖上盖玻片。

③把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜观察,为清晰观察染色体的形态,最好寻找处于__________期的细胞,并与小白鼠正常细胞有丝分裂同时期高倍显微照片进行对比,统计并计算该期变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值),判断这两种化学物质的毒性。

方法2:

将贴附在瓶壁上的细胞用方法1中用到的药剂处理后,继续分瓶培养,这种培养过程称为________。一般而言,这种培养传至______代后就不易传下去了。若细胞传至________代以后,仍不死亡,则说明这些细胞可能发生癌变。比较三个培养瓶中的癌变细胞的数量,判断这两种化学物质的毒性。

 

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