多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如下图。据图回答下列问题：

(1)若已获取PG的mRNA，可通过________获取PG基因。重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是____________。

(2)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有________的培养基进行筛选，理由是______________。之后，还需将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞________现象来鉴别细胞壁是否再生。

(3)由于导入的目的基因能转录出反义RNA，且能与________互补结合，因此可抑制PG基因的正常表达。若________，则可确定转基因番茄培育成功。

(4)将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用________技术；其中，愈伤组织经________形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加____________________。

    多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图回答：

(1) 提取目的基因时，若已获取PG的mRNA，可通过________获取PG基因。在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有________结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成黏性末端。已知BamH Ⅰ酶的识别序列如图甲所示，请在图乙的相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

(2) 重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是__________________________________。

(3) 用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有________的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，培养基中除加入必需的营养物质外，还需加入________。

(4) 由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与____________互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄的________，则可确定转基因番茄获得成功。

(5) 获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用________方法使子代保持转基因的优良性状。

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟
中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少
PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到
番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图回答：

（1）  提取目的基因：①若已获取PG的mRNA，
可通过       获取PG基因。
②在该基因上游加结构A可确保基因的反向[来源:学#科#网]
转录，结构A上应具有          的结合
位点。得到的目的基因两侧需人工合成
BamHI黏性末端。
已知BamHI的识别序列如图甲所示，请在图乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是                    。
（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有          的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，除营养物质外还需在培养基中加入                。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞是否发生              现象，鉴别细胞壁是否再生。
（3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与             互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄       ，则可确定转基因番茄成功。
（4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用           技术，使子代保持转基因的优良性状。