请回答下列有关基因工程的问题：

（1）如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的          片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体就叫做这种生物的           。

（2）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为        。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是         法。转基因动物中采用最多，也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法是        。大肠杆菌最常用的转化方法是：首先用Ca²⁺处理细胞，使细胞处于一种              的生理状态，这种状态的细胞被称作感受态细胞。然后将重组表达载体DNA溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度条件下促进                       ，完成转化过程。

（3）目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。首先，要检测转基因生物        上是否插入了目的基因。其次，还需要检测目的基因是否          。最后检测目的基因是否           。

(4)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似。PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为        

                                                                             。

(5)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb

  即1000个碱基对)，请在下图质粒上画出EcoRV、Mbol的切割位点。

（6）基因工程中使用的限制酶，其特点是                                          。

 基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。“基因敲除细胞”的构建过程如下：

第一步：从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞（ES），在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。

第二步：构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因（同源臂），在同源臂上接入neoR（新霉素抵抗基因）等。由于同源臂与靶基因的DNA正好配对，所以能将表达载体准确地带到靶基因的位置。

第三步：将表达载体导入胚胎干细胞，并与其内靶基因同源重组，完成胚胎干细胞的基因改造。

第四步：基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。基本原理如下图所示。

请根据上述资料，回答下列问题：

（1）在把与靶基因序列同源的目的基因导入受体细胞前，应首先完成              ，在这过程中所需要的工具酶是                              。

（2）如果要获得一只含目的基因的小鼠，则选择的受体细胞通常是            。若用大肠杆菌储存目的基因，则需先将其处理为             细胞。

（3）上述资料中neoR基因的作用最可能是                               。

（4）（2）中获得的小鼠，通过有性生殖产生的后代是否都含该目的基因？       。为什么?             。

莠去津（C₈H₁₄ClN₅）是一种含氮的有机物，有农业生产中常被用做除草剂。由于其在土壤中不易降解，长期使用将严重破坏农林生态环境。为了降解废土壤中的莠去津，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用莠去津的细菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为被其污染的土壤样品。请回答下列问题：

（1）长期使用莠去津的土壤中可能含有只能降解利用莠去津的细菌菌株，这是由于莠去津对细菌具有       作用。在微生物分离鉴定实验中，通常需要培养基中加入        （物质）用以凝固营养成分。

（2）②中的选择磁头基中应以        作为唯一氮源，来筛选目的细菌。莠去津在筛选出的目的细菌中的作用是               。

（3）④作为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长。设置此对照的目的是          。

（4）⑤、⑥、⑦操作的目的是                                      。

（5）莠去津能阻断光反应中的电子传递过程。影响NADPH的形成。研究人员欲将能降解莠去津的基因转移到农作物细胞内。获得该基因的途径除了从细菌中直接分离外，还可以

      达载体时，必须使用限制性内切酶和        的基因之所以能在农作物细胞内表达，其原因是                   

（13分）土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有一个大的质粒叫Ti质粒，它是携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才转入植物细胞的基因组。结构及转化过程如图所示，回答相关问题：


（1）从细胞结构的特点与复杂程度看，土壤农杆菌属于　    　　细胞，其质粒是能够自主          的环状          分子，Ti质粒作为转基因技术的基因表达载体，除了标记基因和目的基因外，还必须具有______________、______________。
（2）为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即祛除瘤基因，将抗旱基因转移至       ，然后在一定条件下将外植体在含       的稀释培养基上培养，此时修饰的T—DNA转入植物细胞并整合到植物基因组中。
（3）将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选，该培养基从功能上看应属于_________培养基，发生转化的外植体开始增殖，经       
过程形成愈伤组织，再通过_________________过程产生不定芽和体细胞胚，最终长出整个植物。
（4）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，在性状水平上鉴定的方法是____________________________________________________________________。在蛋白质水平进行检测的方法是从转基因植株提取蛋白质，进行           ，判断是否产生杂交带。
（5）为获得纯合的转基因植株，还需要对转基因植株进行严格的          。

土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有一个大的质粒叫Ti质粒，它是携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才转入植物细胞的基因组。结构及转化过程如图所示，回答相关问题：

（1）从细胞结构的特点与复杂程度看，土壤农杆菌属于　     　　细胞，其质粒是能够自主           的环状           分子，Ti质粒作为转基因技术的基因表达载体，除了标记基因和目的基因外，还必须具有______________、______________。

（2）为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即祛除瘤基因，将抗旱基因转移至        ，然后在一定条件下将外植体在含        的稀释培养基上培养，此时修饰的T—DNA转入植物细胞并整合到植物基因组中。

（3）将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选，该培养基从功能上看应属于_________培养基，发生转化的外植体开始增殖，经       

过程形成愈伤组织，再通过_________________过程产生不定芽和体细胞胚，最终长出整个植物。

（4）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，在性状水平上鉴定的方法是____________________________________________________________________。在蛋白质水平进行检测的方法是从转基因植株提取蛋白质，进行            ，判断是否产生杂交带。

（5）为获得纯合的转基因植株，还需要对转基因植株进行严格的           。