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研究人员利用基因工程技术对肺癌的治疗进行了大量研究,肺部细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图所示,据图回答
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1.在基因工程中通常选择细菌质粒作为载体,原因是 ;如果某质粒由100 0个脱氧核苷酸组成,脱氧核苷酸平均分子量为a,则该质粒的质量为 。
2.图甲中在构建重组载体时,酶切目的基因和酶切质粒时,所用的限制酶可以不同,但是产生的粘性末端必须是 。
3.图甲中在将酶切后的目的基因导入到酶切后的质粒上时需要的酶是 , 图乙中let-7基因转录过程需要的酶是 ,这 两种酶作用的化学键都是 。
4.EcoR I限制酶只能识别序列一GAATTC一,并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoR I的切点,请画出目的基因两侧被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。
5.原代培养是是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。原代培养随着培养时间的延长和细胞不断分裂,空间因素和营养因素会限制其进一步生长。此时就需要将培养物分割成小的部分(组织细胞分散开),重新接种到另外的培养器皿内再进行培养,这个过程就称为传代或者再培养。图甲中进行传代培养操作时,需要用 酶处理贴附在原代培养培养皿壁上的细胞,以利于传代培养。
6.研究发现,let-7基因能影响RAS基因的表达,其影响机理如图乙所示。从分子水平的角度分析,其作用机理是 。
7.下图所示pBR322是目前常用的人工质粒载体。如果将BamHI处理后的pBR322质粒与用BgIⅡ处理得到的目的基因进行重组,并将重组质粒导入原本无ampR和tetR 的大肠杆菌进行培养。为了检测重组质粒是否成功导入大肠杆菌,现将上述大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是___ _____ ,图三结果显示,多数大肠杆菌内导入的是___ __。
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(12分)请分析下表,回答有关实验的问题。
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组别 |
材料 |
实验条件 |
观察内容 |
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A |
豆浆 |
0.1g/mL的NaOH溶液、0.01g/mL的CuSO4溶液 |
液体的颜色变化 |
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B |
梨汁或苹果汁 |
0.1g/mL的NaOH溶液、0.05g/mL的CuSO4溶液 |
液体的颜色变化 |
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C |
洋葱鳞叶表皮 |
解离液、清水、0.02g/mL的龙胆紫等 |
有丝分裂的过程 |
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D |
菠菜叶 |
二氧化硅、碳酸钙、无水乙醇、层析液等 |
色素种类和颜色 |
(1)A组实验注入试剂以后,对试管液体的处理方法与B组有何不同? 。
(2)B组试剂的使用方法与A组比较,不同之处是B组: 。
(3)C组实验中,在显微镜下观察不到染色体,原因是 。如果一个同学用洋葱根尖制作临时装片,且在低倍镜下观察到洋葱根尖分生区的一个处于中期的细胞位于视野右上方,想在高倍镜下进一步观察这个细胞的染色体的形态和数目,请从下列选项中选择正确的操作步骤的代码并排序 。
①转动粗准焦螺旋 ②转动细准焦螺旋 ③调节反光镜、光圈增加进光量 ④转动转换器,换上高倍镜 ⑤向左下方移动装片 ⑥向右上方移动装片 ⑦向上移动装片 ⑧向下移动装片
洋葱根尖细胞生命活动中,细胞核起非常重要的重要,对细胞核功能的较为全面的阐述应该是
(4)某同学做D实验后,绘制了四种光合色素在滤纸上分离情况(图 1 所示)。据图分析,主要吸收红光的色素是 (填序号)。 另一同学由于研磨绿叶过程中粗心大意,漏加了某些试剂或药品,导致实验结果不理想(图2所示),请指出该同学漏加的试剂或药品 。
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(5)为研究温度对酶活性的影响,某同学根据已提供的实验器材设计出了如下实验方案
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1.用恒温水浴锅、烧杯和铁架台调好水浴装置。 2.将量好的酶溶液和天平称取的蛋白质块分别放入2个试管,然后将2个试管放入同一水浴环境中持续一定时间,使试管内外温度一致,再将酶溶液和蛋白质块(将鸡蛋煮熟后的蛋白部分切成的小块)倒入同一试管中混合,保温并记录蛋白质块消失所需的时间。 3.将酶溶液改成等量的蒸馏水,重复步骤2,并注意与步骤2的温度保持一致,进行对照实验。 4.作好观察记录。 |
你认为该方案存在哪些问题?(4点)
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(12分)请分析下表,回答有关实验的问题。
| 组别 | 材料 | 实验条件 | 观察内容 |
| A | 豆浆 | 0.1g/mL的NaOH溶液、0.01g/mL的CuSO4溶液 | 液体的颜色变化 |
| B | 梨汁或苹果汁 | 0.1g/mL的NaOH溶液、0.05g/mL的CuSO4溶液 | 液体的颜色变化 |
| C | 洋葱鳞叶表皮 | 解离液、清水、0.02g/mL的龙胆紫等 | 有丝分裂的过程 |
| D | 菠菜叶 | 二氧化硅、碳酸钙、无水乙醇、层析液等 | 色素种类和颜色 |
(2)B组试剂的使用方法与A组比较,不同之处是B组: 。
(3)C组实验中,在显微镜下观察不到染色体,原因是 。如果一个同学用洋葱根尖制作临时装片,且在低倍镜下观察到洋葱根尖分生区的一个处于中期的细胞位于视野右上方,想在高倍镜下进一步观察这个细胞的染色体的形态和数目,请从下列选项中选择正确的操作步骤的代码并排序 。
①转动粗准焦螺旋 ②转动细准焦螺旋 ③调节反光镜、光圈增加进光量 ④转动转换器,换上高倍镜 ⑤向左下方移动装片 ⑥向右上方移动装片 ⑦向上移动装片 ⑧向下移动装片
洋葱根尖细胞生命活动中,细胞核起非常重要的重要,对细胞核功能的较为全面的阐述应该是
(4)某同学做D实验后,绘制了四种光合色素在滤纸上分离情况(图 1 所示)。据图分析,主要吸收红光的色素是 (填序号)。 另一同学由于研磨绿叶过程中粗心大意,漏加了某些试剂或药品,导致实验结果不理想(图2所示),请指出该同学漏加的试剂或药品 。
(5)为研究温度对酶活性的影响,某同学根据已提供的实验器材设计出了如下实验方案
| 1.用恒温水浴锅、烧杯和铁架台调好水浴装置。 2.将量好的酶溶液和天平称取的蛋白质块分别放入2个试管,然后将2个试管放入同一水浴环境中持续一定时间,使试管内外温度一致,再将酶溶液和蛋白质块(将鸡蛋煮熟后的蛋白部分切成的小块)倒入同一试管中混合,保温并记录蛋白质块消失所需的时间。 3.将酶溶液改成等量的蒸馏水,重复步骤2,并注意与步骤2的温度保持一致,进行对照实验。 4.作好观察记录。 |