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我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛，下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的示意图。图中质粒表示基因工程中经常选用的载体—pBR322质粒，Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。根据下图回答下列问题（限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同）：
（1）过程②必需的酶是 ，过程④必需的酶是 。⑤过程中为提高成功率，常用 溶液处理大肠杆菌。
（2）如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒pBR322进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时，则形成的DNA片段共 种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段的比例是 。
（3）如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322，完成过程④、⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌（不含Ampr、Tetr抗性质粒）先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选 的大肠杆菌，含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态分别是 ， 。
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科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆
菌的过程。请据图回答：
（1）步骤①和②中常用的工具酶是 ___________ 。
（2）经过①②步骤后，有些质粒上的 ____ 基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒。
（3）步骤③是 的过程。为了促进该过程，应该用 ________ 处理大肠杆菌。
（4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选 _____________________ 。能在C中生长的大肠杆菌有 _____ 种。
（5）步骤⑤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于（选填“D”或“E”） ______
上，请在图中相应的位置上圈出来。
科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答：
（1）步骤①和②中常用的工具酶是 。
（2）经过①和②步骤后，有些质粒上的 基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒。
（3）步骤③是 的过程。为了促进该过程，应该用 处理大肠杆菌。
（4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选 。能在C中生长的大肠杆菌有 种。
（5）步骤⑤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于（选填“D”或“E”） 上，请在图中相应的位置上圈出来。
科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答：
（1）步骤①和②中常用的工具酶是 。
（2）经过①和②步骤后，有些质粒上的 基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒。
（3）步骤③是 的过程。为了促进该过程，应该用 处理大肠杆菌。
（4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基
C上培养，目的是筛选 。能在C中生长的大肠杆菌有 种。
（5）步骤⑤:用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于（选填“D”或“E”） 上，请在图中相应的位置上圈出来。
