题目内容
PCR技术是将某一特定DNA片段在体外酶的作用下,在高温环境中复制出许许多多相同片段的一种方法,利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。
表1
| PCR反应体系 | 50 μL |
| 缓冲液 | 5 μL |
| 脱氧核苷酸 | 1 μL |
| 引物A | 0.5 μL |
| 引物B | 0.5 μL |
| DNA聚合酶 | 0.5 μL |
| 模板DNA | 1~2 μL |
| 加去离子水补足至50 μL |
|
表2
| 反应条件 | 温度 | 时间 |
| 变性 | 95 ℃ | 30 s |
| 复性 | 55 ℃ | 30 s |
| 延伸 | 72 ℃ | 1 min |
| 30个循环后 | 适宜 | 5~10 min |
| 保温 | 4 ℃ | 2 h |
(1)PCR技术的原理是模拟生物体内____________的过程。从上表中可得出,PCR技术与DNA复制相比较,主要区别之一是_____________________________________。此外,从反应条件看,所使用的DNA聚合酶应具有________的特点。
(2)PCR扩增过程中对DNA片段进行高温加热处理,其目的是____________________________________,其作用相当于细胞内________酶的作用。每次循环都需要2种引物的主要原因是________________________________________。
(3)下图为第1轮循环产生的产物。请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。
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(1)DNA复制 不需要ATP(或需要加入引物或不需要解旋酶) 耐高温
(2)使DNA双链解开成为单链 解旋 DNA聚合酶只能从引物的3’端延伸DNA链
(3) ![]()
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